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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 96孔板如何培养金葡菌
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袁汝强

铜虫 (小有名气)

[交流] 96孔板如何培养金葡菌 已有4人参与

最近我在做抑菌试验，我用的是96孔板，可是在我加完菌液24小时后拿去测OD值时发现几乎每个加菌液的空下面都有沉淀的细菌，但是分布不均匀，这样是不是影响结果啊，为什么会有沉淀呢
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如果世间太多繁华，那就聆听吧
1楼 2013-03-18 19:38:17
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-20 17:40:51
这种情况很正常，说明你的抗生素浓度不够。你看你的空白长的没，金葡是最好抑制的。
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悲伤着你的悲伤，幸福着你的幸福
2楼2013-03-19 09:15:39
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younx

至尊木虫 (著名写手)
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抗生素浓度不够，另一个菌量比较大，另外用96孔板测OD值是否应该每小时观察？
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3楼2013-03-19 10:32:23
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袁汝强

铜虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-03-19 09:15:39
这种情况很正常，说明你的抗生素浓度不够。你看你的空白长的没，金葡是最好抑制的。

空白没有长菌，主要是我有菌的孔里，那些细菌都沉在孔底了，我之前用大肠杆菌做过，大肠杆菌都是悬浮在培养液里，很均匀。是不是金葡菌有问题，还是本来就这样。还有如果震荡一下，也可以混匀，96孔板测OD值前要震荡一下吗？我怕以震荡就会使别的孔里的菌或药震到其他的孔里
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4楼2013-03-19 23:18:25
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袁汝强

铜虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by younx at 2013-03-19 10:32:23
抗生素浓度不够，另一个菌量比较大，另外用96孔板测OD值是否应该每小时观察？

我是20小时后测得OD值？还有在这期间在37度的孵箱里要震摇吗？还是静置培养？我的药梯度稀释，第一个梯度是25mg/ml应该很大了吧。我的细菌浓度是把摇好的菌稀释了1000倍。
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5楼2013-03-19 23:24:00
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莹莹陀zws

金虫 (正式写手)
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4楼: Originally posted by 袁汝强 at 2013-03-19 23:18:25
空白没有长菌，主要是我有菌的孔里，那些细菌都沉在孔底了，我之前用大肠杆菌做过，大肠杆菌都是悬浮在培养液里，很均匀。是不是金葡菌有问题，还是本来就这样。还有如果震荡一下，也可以混匀，96孔板测OD值前要震 ...

金葡本来就是这样，我做过，菌体多了自然有沉淀，不用震荡
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6楼2013-03-20 08:02:25
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younx

至尊木虫 (著名写手)
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5楼: Originally posted by 袁汝强 at 2013-03-19 23:24:00
我是20小时后测得OD值？还有在这期间在37度的孵箱里要震摇吗？还是静置培养？我的药梯度稀释，第一个梯度是25mg/ml应该很大了吧。我的细菌浓度是把摇好的菌稀释了1000倍。...

抗生素浓度25mg/ml就太大了啊，25μg还差不多啊。

1000倍稀释浓度也还是大，不过得需要连续观察，每隔1小时或2小时的

96孔板的孔也就装2ml吧，震摇的话就放在微量振荡仪上吧

有沉淀的话用枪头混匀一下
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7楼2013-03-20 08:38:35
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袁汝强

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-03-20 08:02:25
金葡本来就是这样，我做过，菌体多了自然有沉淀，不用震荡...

哦，谢谢
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8楼2013-03-21 09:43:52
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袁汝强

铜虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by younx at 2013-03-20 08:38:35
抗生素浓度25mg/ml就太大了啊，25μg还差不多啊。

1000倍稀释浓度也还是大，不过得需要连续观察，每隔1小时或2小时的

96孔板的孔也就装2ml吧，震摇的话就放在微量振荡仪上吧

有沉淀的话用枪头混匀一下...

说错了，我的药初浓度是2.5然后倍比稀释9个梯度，由于我用的不是抗生素，只是实验合成的一些化合物，所以初浓度高了点，谢谢你的回复
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9楼2013-03-21 09:48:50
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15280424614

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by 莹莹陀zws at 2013-03-20 08:02:25
金葡本来就是这样，我做过，菌体多了自然有沉淀，不用震荡...

金葡菌是沉淀生长么？我现在也遇到这种情况，导致测OD都偏低。以为金葡状态不好，长不起来
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10楼2018-06-02 19:35:51
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