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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 大肠杆菌扩大培养
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guozhi2009

铁虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌扩大培养

各位的大肠杆菌是用锥形瓶培养的么，我的保存在平板培养基上的，怎么知道每次挑多少到锥形瓶呢
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1楼 2013-03-18 11:02:17
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lanlong3000

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-18 21:46:20
amisking: 回帖置顶 2013-03-18 21:46:23
扩培怎么也应该用单菌落吧，长到一起怎么知道里面有没有有问题的，同种菌，菌落之间也可能存在差异，这种情况应该先挑一点培养后，做稀释涂平板分离或者划线，嫌麻烦也可以直接挑到无菌水里打散后分离，得到单菌落后再扩培，至于量嘛，不急可以先挑一个单菌落到装液量5ML试管或者25ML小摇瓶长6小时以上或者过夜，再接到200ML摇瓶，急的话直接挑一个单菌落接200ML摇瓶过夜也能长的差不多饱和了
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7楼2013-03-18 14:53:17
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lihongyue328

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
您可以用接种环挑一下平板上的菌，然后划线到另一个平板上，划几下，接种环用酒精灯烧一烧，待接种环凉了后，再与原来的划线的部分有一些重叠再去接着往下划线，这样重复几次直到划线到平板的最下方，培养12-16小时左右，一般即可长出单菌落，再挑取单菌落于液体培养基（加相应的抗性），希望能够对您有帮助，祝实验顺利！
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10楼2013-03-20 12:52:36
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jingg1990

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大肠杆菌应该是从平板菌种做系列稀释，做出单菌落后，用单菌落接斜面或平板，培养好后，用接种铲在生长较好、较均匀的位置取长1cm左右，宽为1接种铲宽度的菌种于200ml液体培养基中。根据生长情况调整取菌种条的长度即可。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2013-03-19 10:31:53
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

★ ★
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-18 11:28:25
不对呀，应该是筛选菌落后。挑一个菌落到锥形瓶大批量培养
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2楼2013-03-18 11:17:09
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匿名

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3楼2013-03-18 11:50:54
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guozhi2009

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-03-18 11:50:54
1~10个吧，要看你用多大的锥形瓶，加多少培养基了，这个最好试验下

200ml的液体培养基呢，我的大肠杆菌在平板上的菌落长在一起了，不是分散的
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4楼2013-03-18 11:56:58
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guozhi2009

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2013-03-18 11:17:09
不对呀，应该是筛选菌落后。挑一个菌落到锥形瓶大批量培养

看文献上都是调OD600=0.1
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5楼2013-03-18 11:57:52
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匿名

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6楼2013-03-18 12:02:53
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wadecao

禁虫 (正式写手)
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本帖内容被屏蔽
8楼2013-03-18 21:27:17
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