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lws9930

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 求助 双向电泳提取的蛋白质 其浓度用什么测呀? 已有1人参与

各位大师,本人刚开始做双向电泳,组织用蛋白裂解液溶解后,想测其蛋白浓度,但用国产的试剂盒(BCA法)根本就测不出来啊,分光光度计都没法读数。我在测定过程中,还以蛋白裂解液也作为测定的对象,结果发现它同样与试剂盒中的反应液反应。这说明我的蛋白浓度不能用这个试剂盒测定,估计是蛋白裂解液中的某些成分与试剂盒中的东西反应了。请问你们在收集到蛋白后,都是用2D专用的进口试剂盒测定的吗?谢谢!!!
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lws9930: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-20 09:54:31
除了以上各位所言(都很有道理),楼主是否可以再考虑一下:增加所提的蛋白质样品的溶解度,比如适量增减变性试剂浓度或类型,加大离子型、非离子型或两性离子表面活性剂的浓度或类型,加大DTT浓度,适当调整PH稍微主要研究的蛋白质的等电点。
14楼2013-04-19 23:51:01
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