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RP-HPLC中两峰的分离
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ririwowo
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2013-01-29 15:36:21
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cpuliuwei
银虫
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★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
karl2100: 金币+1, 谢谢!
2013-03-10 00:37:45
RP-C18色谱柱:极性嵌合色谱柱,其作用力有2个:氢键作用力(极性基团)和疏水作用力(非极性基团)
增加极性(增加水相)可以提高内嵌极性基团(或极性封端)的活性从而增加氢键作用力,利用物质氢键作用力的不同来达到分离。达到一定比例,其出峰顺序会颠倒。
分离含有较多极性基团的极性物质采用RP-C18柱有效果,采用普通C18则无此效果了。
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8楼
2013-03-09 16:07:16
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raulsam1984
木虫
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ririwowo(金币+1): 谢谢参与
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2013-01-31 17:24:20
楼主,这个不一定。分离的情况主要看你所分离得物质,根据物质的极性,再去调整流动相的比例。RP-HPLC主要用于分离极性小和非极性的物质,有机相的作用是洗脱,水相的作用是增长保留时间,盐通常是是抑制物质解离、修饰峰型的。
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2楼
2013-01-29 15:58:17
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newztl
木虫
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中药2000: 金币+1, 谢谢
2013-01-31 17:24:26
是啊,一般2个峰分开的话,要求分离度达到1.5;常规情况下如果是UV,DAD的检测器等,是要求调整流动相机性,梯度,PH值等,需要把2个峰尽量分开的;但是我们现在做LC-MS/MS,采用同位素内标,2个峰不分开也是没有关系的,2个物质有自己的离子通道,计算RT,面积就可以定性定量了;
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3楼
2013-01-29 16:56:36
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ririwowo
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4楼
2013-01-30 09:30:33
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