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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » RP-HPLC中两峰的分离
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ririwowo

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1楼 2013-01-29 15:36:21
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raulsam1984

木虫 (著名写手)
★ ★
ririwowo(金币+1): 谢谢参与
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-01-31 17:24:20
楼主，这个不一定。分离的情况主要看你所分离得物质，根据物质的极性，再去调整流动相的比例。RP-HPLC主要用于分离极性小和非极性的物质，有机相的作用是洗脱，水相的作用是增长保留时间，盐通常是是抑制物质解离、修饰峰型的。
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2楼2013-01-29 15:58:17
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newztl

木虫 (正式写手)
★ ★
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中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-01-31 17:24:26
是啊，一般2个峰分开的话，要求分离度达到1.5；常规情况下如果是UV，DAD的检测器等，是要求调整流动相机性，梯度，PH值等，需要把2个峰尽量分开的；但是我们现在做LC-MS/MS，采用同位素内标，2个峰不分开也是没有关系的，2个物质有自己的离子通道，计算RT，面积就可以定性定量了；
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3楼2013-01-29 16:56:36
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ririwowo

禁虫 (正式写手)
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4楼2013-01-30 09:30:33
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欲飞无界

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-01-31 17:24:33
是的，一般加水都是有助于分离的。但水过多了影响分析效率和峰型
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5楼2013-01-31 14:25:27
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pharmacistlee

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
中药2000: 金币+1, 谢谢 2013-01-31 17:24:38
不同化合物在色谱柱与流动相之间的分配系数不一样,通过流动相极性的改变是可以达到分离的效果,但是,不是所有的难以分离的色谱峰都可以通过改变极性来解决的.
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6楼2013-01-31 16:51:05
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ririwowo

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7楼2013-02-01 15:18:13
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2013-03-10 00:37:45
RP-C18色谱柱：极性嵌合色谱柱，其作用力有2个：氢键作用力（极性基团）和疏水作用力（非极性基团）
增加极性（增加水相）可以提高内嵌极性基团（或极性封端）的活性从而增加氢键作用力，利用物质氢键作用力的不同来达到分离。达到一定比例，其出峰顺序会颠倒。
分离含有较多极性基团的极性物质采用RP-C18柱有效果，采用普通C18则无此效果了。
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8楼2013-03-09 16:07:16
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