应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 着急啊，大家帮我看看这几个图，谢谢啦！
31/1返回列表
查看: 667  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhejiahuo1

铁虫 (小有名气)

[求助] 着急啊，大家帮我看看这几个图，谢谢啦！

大家好，最近做巢式PCR遇到些问题，想请教下大家。
图1：前六道是第二轮的产物，分别代表PCR时不同的模板浓度，后四道是第一轮的产物。疑问：前六道是什么原因造成从点样孔开始拖尾？后四道又是怎么解释？
图2：第1，3，4,5道均是第二轮产物，为什么3,4,5道不光拖尾，点样孔还是亮的？
图3：前四道均是点样孔亮？为什么呢？
拜托各位大侠了，帮帮找找原因吧！

图1.jpg



图2.jpg



图3.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-26 11:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forever909

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
点样孔发亮的原因可能是污染了，然后那个拖尾，应该不是拖尾的，我当初也出现那样的情况，我一直以为是拖尾呢，然后就尝试各种办法解决，换了酶（mix），降低退火温度等，都是没办法的，后来我就换了引物，结果什么问题都解决了，所以我认为还是引物的问题，要么是引物降解了，要么是引物不和规则，个人意见，仅供参考
赞一下 回复此楼
快乐是最重要的。。。。。。
2楼2013-01-26 12:38:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxt86

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
图1 2nd产物的电泳图应该是引物错配太多造成的吧。建议优化条件，减少错配。可以试试提高退火温度，稀释一下1st产物模板，使用合适的延伸时间。
图2和图3 点样孔发亮如果不是制胶的问题，那就是污染了。再跑块胶看看吧。。。连Loading buffer一起换了试试
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-27 04:06:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhejiahuo1 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +5 archvillain 2026-08-15 9/450 2026-08-15 12:06 by archvillain
[基金申请] filecode +7 cratir 2026-08-14 11/550 2026-08-15 06:19 by 学员8dgXkO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 7lpolszZVXgi 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:41 by 4wMiSEwB6436
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 4/200 2026-08-15 04:17 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭