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lt7510578银虫 (小有名气)
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如何找到一个操纵子的序列
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| 小虫想构建一个载体，想分别克隆乳糖操纵子和阿拉伯糖操纵子，要设计引物，但是不知道怎么查到这个操纵子，还有就是不知道克隆哪些原件，比如阿拉伯糖操纵子，要把启动子pBAD和araC基因都克隆出来？求解答，求长知识 |
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【答案】应助回帖
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在引物中直接加，单个ArcI和LacO都只有20个bp左右，具体的序列可以参考http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9092630 （Hybrid promoter设计） http://partsregistry.org/Promoters/Catalog/Ecoli/Positive （pBad啥的 不过pBad也有不同序列。） pBad的话大概超过100bp了 可以直接pcr出来，两边设计引物行了。 通过PCR加AraI或者LacO的话注意策略，一个promoter里面存在多个重复序列的话有时需要用些特别的方法。 |
2楼2013-01-18 23:32:21
3楼2014-07-23 23:01:17