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lt7510578

银虫 (小有名气)

[求助] 如何找到一个操纵子的序列

小虫想构建一个载体，想分别克隆乳糖操纵子和阿拉伯糖操纵子，要设计引物，但是不知道怎么查到这个操纵子，还有就是不知道克隆哪些原件，比如阿拉伯糖操纵子，要把启动子pBAD和araC基因都克隆出来？求解答，求长知识
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1楼 2013-01-18 14:41:29
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在引物中直接加，单个ArcI和LacO都只有20个bp左右，具体的序列可以参考http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9092630 （Hybrid promoter设计）

http://partsregistry.org/Promoters/Catalog/Ecoli/Positive  （pBad啥的 不过pBad也有不同序列。）

pBad的话大概超过100bp了  可以直接pcr出来，两边设计引物行了。

通过PCR加AraI或者LacO的话注意策略，一个promoter里面存在多个重复序列的话有时需要用些特别的方法。
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2楼2013-01-18 23:32:21
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m情深守护

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-01-18 23:32:21
在引物中直接加，单个ArcI和LacO都只有20个bp左右，具体的序列可以参考http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9092630 （Hybrid promoter设计）

http://partsregistry.org/Promoters/Catalog/Ecoli/Positive  （pB ...

您好前辈，如果对于但就使用阿拉伯糖启动子只需要克隆pbad就可以了吗，这个序列从哪里查呢？然后就可以用阿拉伯糖诱导表达了吗？是这意思吧。
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3楼2014-07-23 23:01:17
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