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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急！求助southern blot相关问题
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mengpei

金虫 (小有名气)

[求助] 急！求助southern blot相关问题


做了好久Southern blot ，但一直没有结果，真的很急，请高手指点一下。
      用质粒做对照，质粒上有很清楚的带，但植物基因组上仍然没有带，目标片段700bp左右，探针310bp。基因组酶切后PCR可以扩增到目标片段，酶切也很充分。谢谢！
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1楼 2013-01-06 23:06:13
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是上样量的问题吗？质粒样品的基因拷贝数肯定比基因组高的，试试做几个不同上样量看看。
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2楼2013-01-07 03:05:30
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Fleaves

至尊木虫 (著名写手)
孟佩，来这求助了？字数不够不让发

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2013-01-08 12:24:19
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lostdipper

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这可能是你样品的问题，目的片段拷贝数高么，如果低拷贝建议你提些DNA，多选几株，另外你的700bp在杂交结果上不一定是700吧？难道你在这个片段两端酶切的？
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4楼2013-01-10 09:14:15
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mengpei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lostdipper at 2013-01-10 09:14:15
这可能是你样品的问题，目的片段拷贝数高么，如果低拷贝建议你提些DNA，多选几株，另外你的700bp在杂交结果上不一定是700吧？难道你在这个片段两端酶切的？

DNA就是烟草的基因组，用ECRO1酶切的，不是目标片段两端，你的意思是提高DNA的质量？
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5楼2013-01-10 16:04:16
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