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求高人指导设计简并引物
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老板叫我研究一种新虫子(鳞翅目,非模式物种)的tan基因,要P全长,可我自己用CODEHOP设计的简并引物都木有全长![]() 他叫我取编码区后对其,取一头一尾,这样设出来的引物我去网上检测了一下退火温度,结果是没有退火温度范围 求高人指导一下 这个全长的引物该怎么设以下是我用来对比的序列 >gi|294459899|ref|NP_001170882.1| tan protein [Bombyx mori] MRELNGTAVCEIQLGRRHAVPVIYVRGSHYEVGFDVGRTFSSIIKSFISNYANLRDFEREYKTDTGRNAY DKTLANMEKRFPYYVKEIRGVADGANVPFYQLFLLQMDDLIGTINDNHVPRNDTGGCSSVAFKNPQHTIL GHTEDAFTETLNHFYIMSAHIIPTPEDREHGAVEERFSSLCYAGHMPGYTMGYNENGMVFSINTLSPLLL KPGNTPRTFITRKLLSAKSFPDAERILRDEGLGIGNGFSVNMIWTDTWGDTKLYNVEVAPDLKGDRSLVH VQKYDQDTLVHCNIYNRINVIEVIGEIVGSSKSRLKAIHAHAAPKTRGDIAEILSDVTGKDFQVFSMQKD AIIKTIAAGIFDVEKRTWSIYIDKPSISEPVAVLPIRFSELESNK >gi|315493450|gb|ADU32897.1| tan [Heliconius melpomene malleti] MKELNGTTVCEKYIGRRRAVPVLYLQGSHYEVGFDVGRNFANVIKSFLSSYANLRDFEKEYKTEVGRNAY EKTLSNMKERFPYYVKEMQGVADGAEVPFHQLFLLQMDDIIGTINDNHIPRNDTGGCSSLAIKTPNSAVL GHTEDAFSETLNHFYIMSAHIIPTDEDKERGAIEERFASLCYAGHLPGYTMGYNENGLVFSINTLSPLVL KPGNTPRTFITRALLASKSYADAERILRDEGLGIANGFSINMIWTNKDGERKIYNAEVAPDLKGDRSIIN IHNYVDEPLVHTNIYQRISIKEVIGPIIDSSTSRLKVIHGHPPPQSQNDVKDILSDTSGTDFQVFQEKKE SIIKTIAAGLFELDKMTWSIFINKPNISEPVAVLPIRFSMLKAN >gi|357603439|gb|EHJ63768.1| tan protein [Danaus plexippus] MSFRTTWIFIFLTLGVLCEPNIGRRRAVPVLYLQGSHYEVGFDVGRNFASIIKSFLSSYENLRDFEKEYK TITGQDAYEKTLANMKKRYPYYVKEMQGVADGANVPFHQLFLLQMDDLIGTINDNHIPRNDTGGCSSLAV KTRKSAILAHTEDAFGETLNHFYIMSAHIIPDPEDKELGAVEERFASLCYAGHMPGYTMGYNENGLVFSI NTLSPLELKPGNTPRTFITRALLASKNFSDAERILRDEGLGIGNGFSINMIWSDKCGDQKIYNVEVAPDL KADRSVLNINNYVDEPLIHTNIYQRLSVKEVIGPIIDSSTARLKAIHAHPPPENGKDLKNILSDISGQDF QVFQEKEDSIIKTIAAGVFELDKMTWSIYINKPNISEPVAVLPIRFSSLSKCES >gi|296040353|dbj|BAJ07601.1| Tan [Papilio polytes] MRELYGNSLSEKHIGRRRVVPVIYLQGSHYEVGYDVGRNFASVIQSFLKTYQGLKDFEREYNTAAGRAAY DSTLVNMKQRYPYYVKEIQGVADGAKVPFYQLFLLHMDDIIGTINDKNSNRVDSGGCSDIAFKSPENVVL GHTEDAPMETVNHFYIMSAHVIPTPEDRELGAVEERFASLCYAGQLPGYTMGFNEHGLVFTINTLSPLVL KPGNTPRMFITRALLTARTPADAEKILLDEGLGIGNGFSTNVIWTYENGERDLMNIEVAPDLSANKSILN IHKYTNETLMHCNAYLREKVQEVTGDIIDSSVTRMKAIHSHAPPRSRRDIESVLSDTTYKDYPVFQTRLD APIQTIAAGIFDMSARTWSIYIDKPDSSEPVAILPIRFSQLNKNH >gi|296040349|dbj|BAJ07599.1| Tan [Papilio machaon] MRGLIGTSLSEKHIGRRRVVPVIYLQGSHYEVGYDVGRNFASIIQSFLKTYQGLKDFEREYNTPSGRAAY DNTLLNMKQRYPYYVKEIQGVADGAKVPFYQLFLLHMDDIIGTINDKNSNRIDDGGCSDIAFKSPENVVL GHTEDAPMETLNHFYIMSAHVIPTPEDRELGAVEERFASLCYAGQLPGYTMGFNEYGLVFTINTLSPLVL KPGNTPRMFITRALLTARTPAEAEKILLDEGLGIGNGFSTNVIWTFENGERDLMNIEVAPDLTANKSILN IQKYTNDTLMHCNAYLRERVQEVTGDIIESSVTRMKAIRRHAPPRSRHDIERVLSDTTYKDFPVFQTRLD APIQTIAAGIFDMSAKTWSIYIDKPDSSEPVALLPMTFSQLNQNH >gi|291486757|dbj|BAI87828.1| Tan [Papilio xuthus] MRGLYGTSLSEKHIGRRRVVPVIYLQGSHYEVGYDVGRNFASIIQSFLKTYQGLKDFEREYNTPSGRAAY DNTLLNMKQRYPYYVKEIQGIADGAKVPFYQLFLLHMDDIIGTINDKTSNRIDDGGCSDIAFKSPENVVL GHTEDAPMETVNHFYIMSAHVIPTPEDRELGAVEERFASVCYAGQLPGYTMGFNEYGLVFTINTLSPLLL KPGNTPRMFITRALLTARTPAEAEKILLDEGLGIGNGFSTNVIWTSENGERDLMNIEVAPNLSGNKSILN IQKYTNDTLMHCNAYLRERVQEVTGDIIESSVTRMKAIRRHSPPRSRRDIERVLSDTTYKDFPVFQTRLD APIQTIAAGIFDMSAKTWSIYIDKPDSSEPVAILPIRFSQLNQNHHN |
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