应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教：反转录反应的试剂问题？
71/1返回列表
查看: 785  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

czcpudai

铜虫 (正式写手)

[求助] 请教：反转录反应的试剂问题？

请教各位大侠：做反转录的时候，各种成分可以单独使用吗？比如 我想用 Promega的M-MLV酶 ， TaKARa的随机引物，还有dNTP，Biouniquer（国产）公司的RNA酶抑制剂 ，这样子组合不知道可以不可以？ 这样子的话，我觉得便宜一些。由于没这样做过，请教一下大家，谢谢解答！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-06 13:09:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以的啊，我们实验室就是这样做的，都是单买的，是没有问题的，放心的去做吧
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2012-12-06 13:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-12-06 13:45:17
可以的啊，我们实验室就是这样做的，都是单买的，是没有问题的，放心的去做吧

，好的，终于有回答的了，非常感谢！！！
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-06 16:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2012-12-06 13:45:17
可以的啊，我们实验室就是这样做的，都是单买的，是没有问题的，放心的去做吧

您好，还有一个问题请教一下版主。我做的是药物对抗氧化基因SOD的表达影响，我分为正常组，模型组，低，中，高剂量组，共5组，每组做三个平行。当我做RT成功后，开始PCR检测SOD的时候，每个平行组的PCR也要做3次吗？还是每个平行组只做一次，然后3个平行组最后取平均值就行了？谢谢解答！！！
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-06 10:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xj8442cn

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以，不过反应缓冲液尽量用原装的，虽然都能进行，但是一般酶都是重组的，反应效率会不同
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-06 13:08:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

czcpudai

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xj8442cn at 2013-01-06 13:08:03
可以，不过反应缓冲液尽量用原装的，虽然都能进行，但是一般酶都是重组的，反应效率会不同

buffer都是与逆转录酶相配的，也就是买的酶中带有相应的buffer。
赞一下 回复此楼
6楼2013-01-06 14:32:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 辛苦了 2013-01-07 16:31:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by czcpudai at 2013-01-06 10:43:24
您好，还有一个问题请教一下版主。我做的是药物对抗氧化基因SOD的表达影响，我分为正常组，模型组，低，中，高剂量组，共5组，每组做三个平行。当我做RT成功后，开始PCR检测SOD的时候，每个平行组的PCR也要做3次吗 ...

5个处理
     重复    正常组，  模型组，  低，  中，   高剂量组
    1
      2
      3
我个人觉得，还是每个平行组要做3次，然后实际上是每个处理组9个Ct值取平均值（做的好的话是9个Ct值都能用，做的不好，比如1，可能当中有个Ct值与另外两个差很大，要剔除）
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
7楼2013-01-07 12:52:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 czcpudai 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭