24小时热门版块排行榜    

查看: 1964  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

肖颖2009

铁虫 (正式写手)

[求助] 有没有人做过稳转染啊?

筛选稳定细胞系有两种方法:1)转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系;2)慢病毒感染筛选稳定细胞系。慢病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效,是目前主流的稳定细胞系筛选方法。
做稳定转染是不是就是根据载体上的抗性基因来筛稳定表达的细胞啊?
具体流程有哪些呢?我最近需要做稳转,想跟大家请教一下。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-12-06 10:44:04
请问你是用的什么载体呢?根据你的描述感觉你用的是腺病毒载体啊~...

你是说包装我的目的基因的载体还是?因为现在的包装系统是有四个质粒的呢
4楼2012-12-06 13:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

sarah-miao

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
肖颖2009: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-06 10:43:15
我最近也一直在做稳定细胞系,一般来说稳转染除了包涵目的基因的转移载体,还需要一些辅助性质粒,帮助这个基因能够稳定转到细胞基因组中的,而筛选阳性克隆的信号是根据转移载体上的抗性基因,我已经做到筛选这一步了,后续就是鉴定的工作了
2楼2012-12-03 20:20:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖颖2009

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-12-03 20:20:35
我最近也一直在做稳定细胞系,一般来说稳转染除了包涵目的基因的转移载体,还需要一些辅助性质粒,帮助这个基因能够稳定转到细胞基因组中的,而筛选阳性克隆的信号是根据转移载体上的抗性基因,我已经做到筛选这一步 ...

请问你是用的什么载体呢?根据你的描述感觉你用的是腺病毒载体啊~
3楼2012-12-06 10:44:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肖颖2009

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-12-06 13:12:45
你是说包装我的目的基因的载体还是?因为现在的包装系统是有四个质粒的呢...

我做的好像不需要辅助质粒哦,直接在哺乳细胞里表达的那种。
你用的骨架质粒和供体质粒是?
5楼2012-12-06 14:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然评审意见 +12 wangmingqi 2026-08-28 17/850 2026-08-29 08:43 by appleren
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 8/400 2026-08-29 08:32 by foolishmani
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +3 德尚中行 2026-08-27 3/150 2026-08-28 15:24 by rongshuxia
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见