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肖颖2009

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[求助] 有没有人做过稳转染啊？

筛选稳定细胞系有两种方法：1）转染质粒后，单克隆方法筛选稳定细胞系；2）慢病毒感染筛选稳定细胞系。慢病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效，是目前主流的稳定细胞系筛选方法。
做稳定转染是不是就是根据载体上的抗性基因来筛稳定表达的细胞啊？
具体流程有哪些呢？我最近需要做稳转，想跟大家请教一下。

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1楼 2012-12-03 15:18:16

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sarah-miao

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【答案】应助回帖

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肖颖2009: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-06 10:43:15

我最近也一直在做稳定细胞系，一般来说稳转染除了包涵目的基因的转移载体，还需要一些辅助性质粒，帮助这个基因能够稳定转到细胞基因组中的，而筛选阳性克隆的信号是根据转移载体上的抗性基因，我已经做到筛选这一步了，后续就是鉴定的工作了

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2楼2012-12-03 20:20:35

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肖颖2009

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2楼: Originally posted by sarah-miao at 2012-12-03 20:20:35
我最近也一直在做稳定细胞系，一般来说稳转染除了包涵目的基因的转移载体，还需要一些辅助性质粒，帮助这个基因能够稳定转到细胞基因组中的，而筛选阳性克隆的信号是根据转移载体上的抗性基因，我已经做到筛选这一步 ...

请问你是用的什么载体呢？根据你的描述感觉你用的是腺病毒载体啊~

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3楼2012-12-06 10:44:04

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