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甲优

金虫 (正式写手)

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专业: 色谱分析

[求助] 梯度设置是否正确

帮我看看这个梯度这样设置有没有问题？谢谢
      时间\流动相          水          乙腈
         0                            75                      25
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1楼 2012-11-27 14:38:00

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confider

木虫 (正式写手)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 2293.9
红花: 1
帖子: 663
在线: 70.5小时
虫号: 475834
注册: 2007-12-08
专业: 药物分析

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
听不到: 金币+2, 谢谢你的解答，有空常来分析板块 2012-12-08 21:18:26
甲优: 金币+2 2012-12-10 14:37:41

梯度设置没有什么具体的规定，这个和仪器的性能，色谱柱的种类，溶剂的类型以及样品的色谱行为有关。
个人设置液相梯度的习惯：
1. 查阅资料，熟悉被分析化合物的溶解性能，作为梯度中强洗脱步骤参考用；
2. 如果已经规定了溶剂，例如水和乙腈，除了注意乙腈10%时的压力变化值以外，其他不用特别在意，如果有缓冲盐的，建议变化的幅度不要太大，防止微环境的盐析出；
3. 先采用一个起点低（有机溶剂比例低），变化慢（梯度变化率低），强洗脱能力强（有机相比例高的时间长）的预运行梯度程序先走一遍，再根据待测物质在什么位置出峰，具体调节梯度，做到待测物出峰处梯度变化不要大，基线要尽可能的平直，强洗脱过程尽可能把样品中的杂质洗脱出来，至于梯度后的平衡时间没有必要一定要长，因为梯度是个动态的平衡过程。