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甲优金虫 (正式写手)
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[求助]
梯度设置是否正确
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帮我看看这个梯度这样设置有没有问题？谢谢 时间\流动相 水 乙腈 0 75 25 5 75 25 20 20 80 25 20 80 30 75 25 35 75 25 |
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甲优: 金币+2 2012-12-10 14:37:41
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甲优: 金币+2 2012-12-10 14:37:41
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梯度设置没有什么具体的规定，这个和仪器的性能，色谱柱的种类，溶剂的类型以及样品的色谱行为有关。 个人设置液相梯度的习惯： 1. 查阅资料，熟悉被分析化合物的溶解性能，作为梯度中强洗脱步骤参考用； 2. 如果已经规定了溶剂，例如水和乙腈，除了注意乙腈10%时的压力变化值以外，其他不用特别在意，如果有缓冲盐的，建议变化的幅度不要太大，防止微环境的盐析出； 3. 先采用一个起点低（有机溶剂比例低），变化慢（梯度变化率低），强洗脱能力强（有机相比例高的时间长）的预运行梯度程序先走一遍，再根据待测物质在什么位置出峰，具体调节梯度，做到待测物出峰处梯度变化不要大，基线要尽可能的平直，强洗脱过程尽可能把样品中的杂质洗脱出来，至于梯度后的平衡时间没有必要一定要长，因为梯度是个动态的平衡过程。 |
8楼2012-12-08 20:30:14
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9楼2012-12-08 21:19:44
liu4bin520
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