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314584069

木虫 (小有名气)

[求助] 植物样品可溶性糖测定 已有1人参与

这几天忙着做植物可溶性糖   方法大致如下:试剂:
1.  80%乙醇
2. 葡萄糖标准溶液:准确称取1.000g葡萄糖溶于蒸馏水并定容至1000ml,从此液中吸取0、1.5、3、4.5、6、7.5、9毫升注入100ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,此溶液即0、15、30、45、60、75、90 mg/L糖溶液,分别吸取系列标准糖液各2ml分别注入7个比色管中,沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5ml,再缓慢地加入5ml浓H2SO4,加完后立即摇动半分钟,放入沸水浴中加热10分钟,取出后放入冷水中迅速冷却,待10分钟后,使之显色稳定,于620nm波长光源下比色,测的光密度。
3.蒽酮试剂:1g蒽酮,用乙酸乙酯溶解,定容至50ml,棕色瓶避光处贮藏;
仪器设备:分光光度计,分析天平,离心管,离心机,恒温水浴,试管,三角瓶,移液管(5、1、0.5ml),剪刀,瓷盘,玻璃棒。水浴锅,电炉。漏斗。滤纸
实验步骤
1.提取
可溶性糖的提取(鲜样)
     取新鲜甘薯样品,擦净表面污物,剪碎混匀,称取2 g,放入带刻度试管中,加入10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入50mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。
2.样品测定   
吸取5ml的糖提取液至一个100ml容量瓶中,用蒸馏水定容,取2ml此稀释的糖提取液至一个具有塞的比色管中,然后沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5 ml,再缓慢地加入5ml浓H2SO4,加完后立即摇动半分钟,放入沸水浴中加热10分钟,取出后放入冷水中迅速冷却,待10分钟后,使之显色稳定,于620nm波长光源下进行比色,测的光密度。
3. 结果计算  
根据光密度读数,自变准曲线上查出含糖量(mg/L),然后代入下列公式中计算:
可溶性糖%(克/100克)=mg/L×100×50/5×10-6/样品重×100
我用的鲜样  出来结果也太大啦    都20%啦    一般鲜样应该在10%以内的   跪求问题出在哪里啊 ?
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食品灬戴子龙

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

问题可能出在你的样品浸提过程: 【取新鲜甘薯样品,擦净表面污物,剪碎混匀,称取2 g,放入带刻度试管中,加入10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入50mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。】反复冲洗试管及残渣,是不是也进到50 mL容量瓶了?
样品测定前,吸取5ml的糖提取液至一个100ml容量瓶中定容。,然后取2 mL进行测定。
待测液中不能有颗粒杂质,如果待测液不澄清,对比色结果影响非常大。浸提后你有没有过滤或离心呢?
5楼2018-04-11 12:06:59
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洪飞飞

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+5, 很详细,很认真的回答! 2012-12-02 18:55:42
1、铜还原-直接滴定法(Lane-Eynon’s method),
    用标准糖液滴定费林试剂,得到费林试剂与糖的相当量,再用待测糖液滴定,用亚(次)甲基蓝作指示剂。
    适测范围:含糖50mg/10~50ml糖待测液。
2、铜还原-高锰酸钾容量法(Munson-Walker method),
   还原糖与费林试剂作用生成Cu2O↓,将Cu2O沉淀洗净后,用Fe2(SO4)3溶解,生成FeSO4,用标准的高锰酸钾溶液滴定生成的Fe2+,求得还原糖消耗的费林试剂量,进而计算出还原糖的含量。
   适测范围:含糖50~80mg/20ml糖待测液

3、费(斐)林-碘量法,
   费林酸钠滴定,根据费林试剂的消耗量计算糖试剂与糖反应生成糖酸和Cu2O↓,剩余的费林试剂中的Cu2+与I-反应,生成I2;用硫代硫的含量。
    适测范围:含糖2~20mg/5~10ml糖待测液。

4、夏费-索姆吉法(Shaller-Somogyi’s method),又称为铜还原-碘量法,
    利用糖与费林试剂作用生成Cu2O↓,碘化钾与碘酸钾作用生成I2,溶液酸化后,Cu2O溶解出的Cu+与碘反应消耗一部分I2,剩余的碘用硫代硫酸钠溶液滴定;为防治Cu2+在酸性条件下氧化I-生成I2干扰测定,在加入碘化钾的同时加入草酸,将其除去。
    适测范围:含糖0.5~2.5mg/5ml糖待测液。

5、氰化盐-碘量法,
       铁氰化钾与还原糖反应,被还原为亚铁氰化钾,剩余的铁氰化钾用碘量法测定(铁氰化钾在酸性条件下氧化I-生成I2,用硫代硫酸钠滴定)。
       适测范围:含糖1~15mg/10ml糖待测液。
2楼2012-11-30 21:45:30
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314584069

木虫 (小有名气)

谢谢   我想用蒽酮比色法做,  滴定的方法太麻烦,
3楼2012-12-01 10:46:35
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jane2v

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我最近也在做,但是不懂楼主为什么稀释两次?我直接一次定到50ml,照你的方案去计算,咋看你的公式和我的有很大出路,另外,想请教一下,我测出来的OD值都超过了我的标线,那是不是这个标线就不能用吖?谢谢
4楼2013-01-16 15:11:18
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