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zhiwu7386

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[交流] 【求助/交流】求扫描电镜植物样品制备的简单方法？已有2人参与

我看到一种方法只用了液氮干燥，然后切成碎片再冷冻干燥，其样品看起来基本没变形，可我用液氮一冻就变形了，有没有什么窍门即简单又不用使植物变形？
The plants were separated into roots, stems, and leaves, frozen in liquid nitrogen, and then fractured into small pieces with a blunt knife. The pieces were freeze-dried overnight at －30 度 while under a vacuum (15－25 torr) using a Labconco freezeedry system (Freezone 4.5, Labconco, Kansas City, MO, USA). Samples were mounted on aluminum stubs with double-sided carbon tape. The SEM bservations were performed using a JEOL JSM-5400 LV scanning electron microscope in low vacuum mode using backscattered electron imaging.

[ Last edited by 1949stone on 2010-3-23 at 13:51 ]

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1楼 2010-03-23 08:20:13

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zhiwu7386

金虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by zhiwu7386 at 2010-03-23 08:20:13:
我看到一种方法只用了液氮干燥，然后切成碎片再冷冻干燥，其样品看起来基本没变形，可我用液氮一冻就变形了，有没有什么窍门即简单又不用使植物变形？
The plants were separated into roots, stems, and leaves ...

怎么没人回答呀？

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2楼2010-03-25 15:20:54

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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

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zhiwu7386(金币+1): 2010-04-01 05:48
lstt09nk(金币+3):感谢交流，热心虫友~~ 2010-05-29 22:11:53
zhiwu7386(金币+1): 2010-05-30 06:55:28

不知道你的材料属于什么类型的。如果可以，参照如下程序：
用Ph7.2磷酸盐缓冲液清洗。之后用2.5﹪戊二醛前固定24h（放入0－4℃冰箱中）即可。乙醇系列30﹪－50﹪－70﹪－85﹪－95﹪－100﹪（2次）逐级脱水（在第一次用100%乙醇脱水的时候将临界点干燥仪降温至-10℃），每级15min，并适当摇动，保证脱水干净。第一步用醋酸(异)戊酯：乙醇＝1：1的混合液浸泡10min，第二步用醋酸异戊酯浸泡10min，适当摇动。临界点干燥：代换后的样品转入样品篮中，放进预冷的临界点干燥仪样品室内，盖好室盖后注入液体二氧化碳，以淹没样品为准，再升温至35℃让其气化，观察液体全气化后慢慢放气，必须待气放尽才能开盖取样（2-3小时）

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3楼2010-03-31 20:52:55

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