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木虫 (小有名气)

[求助] 植物样品可溶性糖测定 已有1人参与

这几天忙着做植物可溶性糖   方法大致如下:试剂:
1.  80%乙醇
2. 葡萄糖标准溶液:准确称取1.000g葡萄糖溶于蒸馏水并定容至1000ml,从此液中吸取0、1.5、3、4.5、6、7.5、9毫升注入100ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,此溶液即0、15、30、45、60、75、90 mg/L糖溶液,分别吸取系列标准糖液各2ml分别注入7个比色管中,沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5ml,再缓慢地加入5ml浓H2SO4,加完后立即摇动半分钟,放入沸水浴中加热10分钟,取出后放入冷水中迅速冷却,待10分钟后,使之显色稳定,于620nm波长光源下比色,测的光密度。
3.蒽酮试剂:1g蒽酮,用乙酸乙酯溶解,定容至50ml,棕色瓶避光处贮藏;
仪器设备:分光光度计,分析天平,离心管,离心机,恒温水浴,试管,三角瓶,移液管(5、1、0.5ml),剪刀,瓷盘,玻璃棒。水浴锅,电炉。漏斗。滤纸
实验步骤
1.提取
可溶性糖的提取(鲜样)
     取新鲜甘薯样品,擦净表面污物,剪碎混匀,称取2 g,放入带刻度试管中,加入10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入50mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。
2.样品测定   
吸取5ml的糖提取液至一个100ml容量瓶中,用蒸馏水定容,取2ml此稀释的糖提取液至一个具有塞的比色管中,然后沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5 ml,再缓慢地加入5ml浓H2SO4,加完后立即摇动半分钟,放入沸水浴中加热10分钟,取出后放入冷水中迅速冷却,待10分钟后,使之显色稳定,于620nm波长光源下进行比色,测的光密度。
3. 结果计算  
根据光密度读数,自变准曲线上查出含糖量(mg/L),然后代入下列公式中计算:
可溶性糖%(克/100克)=mg/L×100×50/5×10-6/样品重×100
我用的鲜样  出来结果也太大啦    都20%啦    一般鲜样应该在10%以内的   跪求问题出在哪里啊 ?
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jane2v

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我最近也在做,但是不懂楼主为什么稀释两次?我直接一次定到50ml,照你的方案去计算,咋看你的公式和我的有很大出路,另外,想请教一下,我测出来的OD值都超过了我的标线,那是不是这个标线就不能用吖?谢谢
4楼2013-01-16 15:11:18
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