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314584069木虫 (小有名气)
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植物样品可溶性糖测定 已有1人参与
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这几天忙着做植物可溶性糖 方法大致如下：试剂： 1. 80%乙醇 2. 葡萄糖标准溶液:准确称取1.000g葡萄糖溶于蒸馏水并定容至1000ml，从此液中吸取0、1.5、3、4.5、6、7.5、9毫升注入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，此溶液即0、15、30、45、60、75、90 mg/L糖溶液，分别吸取系列标准糖液各2ml分别注入7个比色管中，沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5ml，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，加完后立即摇动半分钟，放入沸水浴中加热10分钟，取出后放入冷水中迅速冷却，待10分钟后，使之显色稳定，于620nm波长光源下比色，测的光密度。 3.蒽酮试剂：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光处贮藏； 仪器设备:分光光度计，分析天平，离心管，离心机，恒温水浴，试管，三角瓶，移液管（5、1、0.5ml），剪刀，瓷盘，玻璃棒。水浴锅，电炉。漏斗。滤纸 实验步骤 1.提取 可溶性糖的提取（鲜样） 取新鲜甘薯样品，擦净表面污物，剪碎混匀，称取2 g，放入带刻度试管中，加入10mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液过滤入50mL容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。 2.样品测定 吸取5ml的糖提取液至一个100ml容量瓶中，用蒸馏水定容，取2ml此稀释的糖提取液至一个具有塞的比色管中，然后沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5 ml，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，加完后立即摇动半分钟，放入沸水浴中加热10分钟，取出后放入冷水中迅速冷却，待10分钟后，使之显色稳定，于620nm波长光源下进行比色，测的光密度。 3. 结果计算 根据光密度读数，自变准曲线上查出含糖量（mg/L），然后代入下列公式中计算： 可溶性糖%（克/100克)=mg/L×100×50/5×10-6/样品重×100 我用的鲜样 出来结果也太大啦 都20%啦 一般鲜样应该在10%以内的 跪求问题出在哪里啊 ？ |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+5, 很详细，很认真的回答！ 2012-12-02 18:55:42
gyfgood: 金币+5, 很详细，很认真的回答！ 2012-12-02 18:55:42
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1、铜还原－直接滴定法(Lane-Eynon’s method)， 用标准糖液滴定费林试剂，得到费林试剂与糖的相当量，再用待测糖液滴定，用亚(次)甲基蓝作指示剂。 适测范围：含糖50mg/10～50ml糖待测液。 2、铜还原－高锰酸钾容量法(Munson-Walker method)， 还原糖与费林试剂作用生成Cu2O↓，将Cu2O沉淀洗净后，用Fe2(SO4)3溶解，生成FeSO4，用标准的高锰酸钾溶液滴定生成的Fe2+,求得还原糖消耗的费林试剂量，进而计算出还原糖的含量。 适测范围：含糖50～80mg/20ml糖待测液 3、费(斐)林－碘量法， 费林酸钠滴定，根据费林试剂的消耗量计算糖试剂与糖反应生成糖酸和Cu2O↓，剩余的费林试剂中的Cu2+与I-反应，生成I2；用硫代硫的含量。 适测范围：含糖2～20mg/5～10ml糖待测液。 4、夏费－索姆吉法(Shaller-Somogyi’s method)，又称为铜还原－碘量法， 利用糖与费林试剂作用生成Cu2O↓，碘化钾与碘酸钾作用生成I2，溶液酸化后，Cu2O溶解出的Cu+与碘反应消耗一部分I2，剩余的碘用硫代硫酸钠溶液滴定；为防治Cu2+在酸性条件下氧化I-生成I2干扰测定，在加入碘化钾的同时加入草酸，将其除去。 适测范围：含糖0.5～2.5mg/5ml糖待测液。 5、氰化盐－碘量法， 铁氰化钾与还原糖反应，被还原为亚铁氰化钾，剩余的铁氰化钾用碘量法测定(铁氰化钾在酸性条件下氧化I－生成I2，用硫代硫酸钠滴定)。 适测范围：含糖1～15mg/10ml糖待测液。 |
2楼2012-11-30 21:45:30
4楼2013-01-16 15:11:18
食品灬戴子龙
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