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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 植物样品可溶性糖测定
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木虫 (小有名气)

[求助] 植物样品可溶性糖测定 已有1人参与

这几天忙着做植物可溶性糖   方法大致如下：试剂：
1.  80%乙醇
2. 葡萄糖标准溶液:准确称取1.000g葡萄糖溶于蒸馏水并定容至1000ml，从此液中吸取0、1.5、3、4.5、6、7.5、9毫升注入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，此溶液即0、15、30、45、60、75、90 mg/L糖溶液，分别吸取系列标准糖液各2ml分别注入7个比色管中，沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5ml，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，加完后立即摇动半分钟，放入沸水浴中加热10分钟，取出后放入冷水中迅速冷却，待10分钟后，使之显色稳定，于620nm波长光源下比色，测的光密度。
3.蒽酮试剂：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光处贮藏；
仪器设备:分光光度计，分析天平，离心管，离心机，恒温水浴，试管，三角瓶，移液管（5、1、0.5ml），剪刀，瓷盘，玻璃棒。水浴锅，电炉。漏斗。滤纸
实验步骤
1.提取
可溶性糖的提取（鲜样）
     取新鲜甘薯样品，擦净表面污物，剪碎混匀，称取2 g，放入带刻度试管中，加入10mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液过滤入50mL容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。
2.样品测定   
吸取5ml的糖提取液至一个100ml容量瓶中，用蒸馏水定容，取2ml此稀释的糖提取液至一个具有塞的比色管中，然后沿管壁缓缓注入蒽酮试剂0.5 ml，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，加完后立即摇动半分钟，放入沸水浴中加热10分钟，取出后放入冷水中迅速冷却，待10分钟后，使之显色稳定，于620nm波长光源下进行比色，测的光密度。
3. 结果计算  
根据光密度读数，自变准曲线上查出含糖量（mg/L），然后代入下列公式中计算：
可溶性糖%（克/100克)=mg/L×100×50/5×10-6/样品重×100
我用的鲜样  出来结果也太大啦    都20%啦    一般鲜样应该在10%以内的   跪求问题出在哪里啊 ？
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1楼 2012-11-25 20:30:28
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洪飞飞

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyfgood: 金币+5, 很详细，很认真的回答！ 2012-12-02 18:55:42
1、铜还原－直接滴定法(Lane-Eynon’s method)，
    用标准糖液滴定费林试剂，得到费林试剂与糖的相当量，再用待测糖液滴定，用亚(次)甲基蓝作指示剂。
    适测范围：含糖50mg/10～50ml糖待测液。
2、铜还原－高锰酸钾容量法(Munson-Walker method)，
   还原糖与费林试剂作用生成Cu2O↓，将Cu2O沉淀洗净后，用Fe2(SO4)3溶解，生成FeSO4，用标准的高锰酸钾溶液滴定生成的Fe2+,求得还原糖消耗的费林试剂量，进而计算出还原糖的含量。
   适测范围：含糖50～80mg/20ml糖待测液

3、费(斐)林－碘量法，
   费林酸钠滴定，根据费林试剂的消耗量计算糖试剂与糖反应生成糖酸和Cu2O↓，剩余的费林试剂中的Cu2+与I-反应，生成I2；用硫代硫的含量。
    适测范围：含糖2～20mg/5～10ml糖待测液。

4、夏费－索姆吉法(Shaller-Somogyi’s method)，又称为铜还原－碘量法，
    利用糖与费林试剂作用生成Cu2O↓，碘化钾与碘酸钾作用生成I2，溶液酸化后，Cu2O溶解出的Cu+与碘反应消耗一部分I2，剩余的碘用硫代硫酸钠溶液滴定；为防治Cu2+在酸性条件下氧化I-生成I2干扰测定，在加入碘化钾的同时加入草酸，将其除去。
    适测范围：含糖0.5～2.5mg/5ml糖待测液。

5、氰化盐－碘量法，
       铁氰化钾与还原糖反应，被还原为亚铁氰化钾，剩余的铁氰化钾用碘量法测定(铁氰化钾在酸性条件下氧化I－生成I2，用硫代硫酸钠滴定)。
       适测范围：含糖1～15mg/10ml糖待测液。
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2楼2012-11-30 21:45:30
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314584069

木虫 (小有名气)
谢谢   我想用蒽酮比色法做，  滴定的方法太麻烦，
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3楼2012-12-01 10:46:35
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jane2v

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我最近也在做，但是不懂楼主为什么稀释两次？我直接一次定到50ml，照你的方案去计算，咋看你的公式和我的有很大出路，另外，想请教一下，我测出来的OD值都超过了我的标线，那是不是这个标线就不能用吖？谢谢
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4楼2013-01-16 15:11:18
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食品灬戴子龙

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

问题可能出在你的样品浸提过程： 【取新鲜甘薯样品，擦净表面污物，剪碎混匀，称取2 g，放入带刻度试管中，加入10mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液过滤入50mL容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。】反复冲洗试管及残渣，是不是也进到50 mL容量瓶了？
样品测定前，吸取5ml的糖提取液至一个100ml容量瓶中定容。，然后取2 mL进行测定。
待测液中不能有颗粒杂质，如果待测液不澄清，对比色结果影响非常大。浸提后你有没有过滤或离心呢？
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5楼2018-04-11 12:06:59
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食品灬戴子龙

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 食品灬戴子龙 at 2018-04-11 12:06:59
问题可能出在你的样品浸提过程： 【取新鲜甘薯样品，擦净表面污物，剪碎混匀，称取2 g，放入带刻度试管中，加入10mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液过滤入50mL容量瓶中，反复冲洗试管 ...

抱歉，我看到“过滤”二字了。应该可以排除我说的原因了。
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6楼2018-04-11 22:10:30
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