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童心依旧

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒的若干问题!!!

小弟小硕一名,最近会收到国外教授给的质粒,由于一点这方面的专业背景都没有
所以想请教一下各位老师,这个质粒需要在什么环境下保存?如果我想对其洗脱,提取,扩增,鉴定,都需要一些怎么样的步骤?
真的很不懂,但我会虚心学习,还请大家不吝赐教!
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wangmingyue

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
-20保存是没有问题的,但是我分析教授寄给你的质粒肯定不足以完成你的后续实验,你需要将质粒洗脱下来之后,转化入菌体扩增培养,然后再将质粒从菌体中提取出来。建议看看大肠杆菌的转化和质粒的提取方面的书籍文献。转化后的菌体可以冷冻保存。这样无限扩增,保证够实验所用。

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4楼2012-11-21 18:54:52
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tiangeyifang

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
-20℃的冰箱保存就可以了
2楼2012-11-21 12:06:48
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jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
寄过来之后需要-20保存,然后需要用的时候直接用ddH2O洗脱下来,然后做转化就可以的
3楼2012-11-21 12:19:38
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lo58688

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
-20是没有问题的,我们老板前段时间也让我做过同样的事情,先用ddH2O溶解,测浓度,转化DH5α或者gold菌中,扩增,保种,但要注意弄清楚你的载体的抗性。
5楼2012-11-21 21:02:50
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