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不鸣鸟木虫 (正式写手)
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[求助]
求助设计引物加两个酶切位点
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要扩增一段1.6~1.7kb左右的目的基因，筛选出了一对效果比较好的引物： 上游：5‘-GTGATTATTCATTTCGGAGGGTG-3’ 下游：5‘-CAGGGTTCTTAATACATACATTGCT-3’ 现在不想用T载体的酶切位点，想用simple T 克隆。在目的基因5’端加XbaI 酶切位点，3‘端加SalI酶切位点 SalI识别位点 5’-G’‘TCGAC-3' 3'-CAGCT,G-5' XbaI识别位点 5‘-T’‘CTAGA-3’ 3‘-AGATC,T-5' 请指导一下具体怎么加，需要加保护碱基吗 或者教给我方法，有资料也可以 新手先谢谢啦 |
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不鸣鸟
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【答案】应助回帖
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draco1987
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那个。。。实在不好意思，刚才我脑抽了，带XbaI酶切位点的是pMD19-T，不是simple5楼2012-11-02 15:59:59
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