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jhsunjing

铁虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量 阴性曲线上扬怎么办 已有1人参与

探针法荧光定量PCR

模板序列:
GGGGATGGGGAGACCCAATTCCTGGATCTGATGAGAGCGGTAGCAAATAGCATGAGGGAGGCGCCAAACTCTGCACAGGGCACTCCCCAATCGGGGCCTCCCCCAACTCCTGGGCCATCCCAAGATAACGACACCGACTGGGGGTAT

设计引物:【存在Dimer和cross Dimer】

上:5’- GAGACCCAATTCCTG-3’
下:5’- CCTGTGCAGAGTTTG-3’

探针:5’-FAM-TTGCTACCGCTCTCATCAGA-MGB-3’

扩增过程,阴性对照在30个循环就会出现上扬曲线,是因为二聚体的原因么?
二聚体会造成探针的荧光增强么,还是探针与引物结合?
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jhsunjing

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2012-10-30 10:46:03
图呢?上图上图看看看看

图片在仪器室,没有拷贝出来,就是很明显的上扬曲线!
3楼2012-10-30 12:24:42
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