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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 超级感受态制备
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)

[求助] 超级感受态制备

我制了两批超级感受态细胞了，可是总是效果不是很好。刚制好的感受态细胞在有有氨苄的板子上长的也很好，求原因。宿主细胞已经换过一次了，求原因。很着急啊！谢谢
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1楼 2012-10-27 09:18:37
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aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kabuqinuo89: 金币+1 2012-10-27 10:48:41
1、可能氨苄失效。2、可能菌本身有氨苄抗性或受到污染。
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汇天下之贤
2楼2012-10-27 10:30:26
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by aloon111 at 2012-10-27 10:30:26
1、可能氨苄失效。2、可能菌本身有氨苄抗性或受到污染。

除了这个还有别的原因吗
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3楼2012-10-27 10:48:36
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-10-27 15:55:44
kabuqinuo89: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-10-28 09:16:46
你这俨然已经不是转化效率的问题了~因为理论上讲感受态细胞是对氨苄敏感的~
其实还是跟楼上讲的一样，主要问题应该还是氨苄失效，菌株有抗性或者被污染。
先问一下你制备好的感受态细胞在氨苄的板子上是长成菌苔么？长成菌苔的话更有可能是菌株被污染了~当然你也可以把宿主细胞的原始菌液拿来测试看看它是不是氨苄敏感来进一步检测。
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4楼2012-10-27 11:03:29
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dongniaoxin

铁杆木虫 (正式写手)

响当当的木头

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们公司都是买制备好的，如果你实在找不出原因就买吧
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没有梦就走，没有错就不向谁低头
5楼2012-10-27 21:24:30
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kabuqinuo89

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by weigh1111 at 2012-10-27 11:03:29
你这俨然已经不是转化效率的问题了~因为理论上讲感受态细胞是对氨苄敏感的~
其实还是跟楼上讲的一样，主要问题应该还是氨苄失效，菌株有抗性或者被污染。
先问一下你制备好的感受态细胞在氨苄的板子上是长成菌苔么 ...

没有菌苔 都是单菌落  长的还挺好 呵呵。我换些原始菌株得了，懒得验证了
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6楼2012-10-28 09:16:38
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