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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC梯度问题
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vermouth325

木虫 (小有名气)

[求助] HPLC梯度问题

我现在测得样品极性都非常大，试了几个梯度出峰都在0.5min左右，有没有谁有好的方法可以控制出峰时间在1.5min之后，我是新手，希望大家多多帮忙
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我在看得見你的角落，給你安全感
1楼 2012-10-25 10:06:21
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
vermouth325: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-10-25 10:26:05
vermouth325: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-10-25 12:05:05
调保留时间有很多方法呀，该流动相，调节流动相中有机相的比例，调流速，换长一点的柱子，调节柱温等等有很多的办法，像你的问题，你可以把已经换成甲醇试试，柱温调低点，不知道你柱子是多长的，用250Cm的试试，
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vermouth325
4楼2012-10-25 10:23:19
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fujinguo06

木虫 (著名写手)
我也遇到了这样的问题，极性大的物质在C18柱中很快出峰，似乎是没有保留，因此，估计得用异丙醇过渡后，试一试在正相条件下的分离效果。
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7楼2012-10-25 11:21:24
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crity328

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by fujinguo06 at 2012-10-25 11:21:24
我也遇到了这样的问题，极性大的物质在C18柱中很快出峰，似乎是没有保留，因此，估计得用异丙醇过渡后，试一试在正相条件下的分离效果。

可以用正相柱，反相流动相，但是要注意有机相比例不要太低。
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故天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为，所以动心忍性，曾益其所不能。
8楼2012-10-25 11:27:29
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lhp123789

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-10-25 12:04:54
嗯，我换了一根长柱子，出峰到后面了，谢谢了呀...

嗯，不客气，以后多交流。
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10楼2012-10-25 13:10:46
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316890568

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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vermouth325: 金币+1, ★有帮助 2012-10-25 10:15:28
你可以把流动相比例调小点啊
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2楼2012-10-25 10:09:29
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vermouth325

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 316890568 at 2012-10-25 10:09:29
你可以把流动相比例调小点啊

我用的流动相是水，乙腈。起始浓度是10%，走10-100的梯度，具体怎么调整能说具体一点么，这批样品急着测呢
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3楼2012-10-25 10:15:11
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mikegu_2000

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-10-25 10:15:11
我用的流动相是水，乙腈。起始浓度是10%，走10-100的梯度，具体怎么调整能说具体一点么，这批样品急着测呢...

增大极性，乙腈的初始浓度继续降低呗
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5楼2012-10-25 10:35:25
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crity328

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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vermouth325: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-10-25 11:45:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-10-25 10:15:11
我用的流动相是水，乙腈。起始浓度是10%，走10-100的梯度，具体怎么调整能说具体一点么，这批样品急着测呢...

个人认为与梯度没有太大的关系，如果你极性非常大，而且用的反相色谱柱的话，估计改变温度和柱子长度及流动相比例，调整的意义不大，因为极性太大的话在反相柱子中基本没有保留的。
那么有2个方法供你参考：
1.如果样品含有盐的话，用反相色谱柱的话建议你加离子对试剂进去调整。
2.如果不含的话，建议更换色谱柱，如氰基柱或氨基柱，用反相流动相调整。
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故天将降大任于斯人也，必先苦其心志，劳其筋骨，饿其体肤，空乏其身，行拂乱其所为，所以动心忍性，曾益其所不能。
6楼2012-10-25 10:59:18
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vermouth325

木虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by lhp123789 at 2012-10-25 10:23:19
调保留时间有很多方法呀，该流动相，调节流动相中有机相的比例，调流速，换长一点的柱子，调节柱温等等有很多的办法，像你的问题，你可以把已经换成甲醇试试，柱温调低点，不知道你柱子是多长的，用250Cm的试试，

嗯，我换了一根长柱子，出峰到后面了，谢谢了呀
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我在看得見你的角落，給你安全感
9楼2012-10-25 12:04:54
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