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vermouth325

木虫 (小有名气)

[求助] HPLC梯度问题

我现在测得样品极性都非常大,试了几个梯度出峰都在0.5min左右,有没有谁有好的方法可以控制出峰时间在1.5min之后,我是新手,希望大家多多帮忙
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lhp123789

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vermouth325: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-10-25 10:26:05
vermouth325: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-10-25 12:05:05
调保留时间有很多方法呀,该流动相,调节流动相中有机相的比例,调流速,换长一点的柱子,调节柱温等等有很多的办法,像你的问题,你可以把已经换成甲醇试试,柱温调低点,不知道你柱子是多长的,用250Cm的试试,

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4楼2012-10-25 10:23:19
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fujinguo06

木虫 (著名写手)

我也遇到了这样的问题,极性大的物质在C18柱中很快出峰,似乎是没有保留,因此,估计得用异丙醇过渡后,试一试在正相条件下的分离效果。
7楼2012-10-25 11:21:24
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crity328

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by fujinguo06 at 2012-10-25 11:21:24
我也遇到了这样的问题,极性大的物质在C18柱中很快出峰,似乎是没有保留,因此,估计得用异丙醇过渡后,试一试在正相条件下的分离效果。

可以用正相柱,反相流动相,但是要注意有机相比例不要太低。
故天将降大任于斯人也,必先苦其心志,劳其筋骨,饿其体肤,空乏其身,行拂乱其所为,所以动心忍性,曾益其所不能。
8楼2012-10-25 11:27:29
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lhp123789

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-10-25 12:04:54
嗯,我换了一根长柱子,出峰到后面了,谢谢了呀...

嗯,不客气,以后多交流。
10楼2012-10-25 13:10:46
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普通回帖

316890568

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
vermouth325: 金币+1, 有帮助 2012-10-25 10:15:28
你可以把流动相比例调小点啊
2楼2012-10-25 10:09:29
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vermouth325

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 316890568 at 2012-10-25 10:09:29
你可以把流动相比例调小点啊

我用的流动相是水,乙腈。起始浓度是10%,走10-100的梯度,具体怎么调整能说具体一点么,这批样品急着测呢
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3楼2012-10-25 10:15:11
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mikegu_2000

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-10-25 10:15:11
我用的流动相是水,乙腈。起始浓度是10%,走10-100的梯度,具体怎么调整能说具体一点么,这批样品急着测呢...

增大极性,乙腈的初始浓度继续降低呗
5楼2012-10-25 10:35:25
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crity328

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
vermouth325: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-10-25 11:45:30
引用回帖:
3楼: Originally posted by vermouth325 at 2012-10-25 10:15:11
我用的流动相是水,乙腈。起始浓度是10%,走10-100的梯度,具体怎么调整能说具体一点么,这批样品急着测呢...

个人认为与梯度没有太大的关系,如果你极性非常大,而且用的反相色谱柱的话,估计改变温度和柱子长度及流动相比例,调整的意义不大,因为极性太大的话在反相柱子中基本没有保留的。
那么有2个方法供你参考:
1.如果样品含有盐的话,用反相色谱柱的话建议你加离子对试剂进去调整。
2.如果不含的话,建议更换色谱柱,如氰基柱或氨基柱,用反相流动相调整。
故天将降大任于斯人也,必先苦其心志,劳其筋骨,饿其体肤,空乏其身,行拂乱其所为,所以动心忍性,曾益其所不能。
6楼2012-10-25 10:59:18
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vermouth325

木虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by lhp123789 at 2012-10-25 10:23:19
调保留时间有很多方法呀,该流动相,调节流动相中有机相的比例,调流速,换长一点的柱子,调节柱温等等有很多的办法,像你的问题,你可以把已经换成甲醇试试,柱温调低点,不知道你柱子是多长的,用250Cm的试试,

嗯,我换了一根长柱子,出峰到后面了,谢谢了呀
我在看得見你的角落,給你安全感
9楼2012-10-25 12:04:54
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