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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC波长该如何选择
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zpm1987

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC波长该如何选择 已有16人参与

最近比较烦恼，做HPLC时走空白梯度老是有鬼峰出现，选的波长是215，但在254鬼峰就没有，一开始觉得可能是流动相脏了，但都换了还是有，但奇怪的是以前摸方法是也走过空白梯度鬼峰就没有了，但现在怎么重现都重现不出来，我本人觉得能不能把吸收波长选高一点干扰会少很多，但所做的一系列化合物大部分强吸收都在210-220该怎么办了，鬼峰太多真的无法做了
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没有跨不过的坎
1楼 2010-06-21 19:32:42
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lovefred

银虫 (正式写手)
★
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流动相是啥？水楼主要尤其注意。。要是梯度洗脱的话，考虑下是不是梯度设计的不适合。。而且梯度走低波长很麻烦。。很麻烦。。楼主考虑下是不是增高到220或者弄个等度的。。
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2楼2010-06-21 21:00:51
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zpm1987

银虫 (小有名气)
流动相是乙腈和磷酸盐，觉得走的梯度还是挺倒得，0.0min    80的缓冲液，20的乙腈，30.0min   10的缓冲液，90的乙腈。
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没有跨不过的坎
3楼2010-06-22 08:25:31
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lufq

银虫 (小有名气)
★
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乙腈有问题，我的经验这一段时间乙腈不是很纯。
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4楼2010-06-22 08:36:03
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liuquan7180

木虫 (知名作家)
★
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重复不出来我也觉得应该是试剂的问题 不会真的跟4楼大侠说的情况一样吧？
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5楼2010-06-22 08:49:26
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henrykaka

铁杆木虫 (正式写手)

henry
★
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楼主貌似做的是酸类的物质？可以用用较低的PH的单一酸作为流动相
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goodgoodstudyfordoctor-graduate!!!
6楼2010-06-22 08:51:47
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jifan

木虫 (著名写手)
★
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有可能是乙腈的问题,换一瓶新的试试
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7楼2010-06-22 08:54:32
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lc1227

金虫 (小有名气)
★
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看看是不是泵不干净。把泵用酒精泡着，超声一下，泵不干净会有气泡进去，也会有坏峰的
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8楼2010-06-22 08:57:59
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googlegood
恭喜恭喜
9楼2010-06-22 09:02:55
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forging

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你选择的波长太低了，接近流动相了
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10楼2010-06-22 09:17:08
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