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zpm1987

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC波长该如何选择 已有16人参与

最近比较烦恼,做HPLC时走空白梯度老是有鬼峰出现,选的波长是215,但在254鬼峰就没有,一开始觉得可能是流动相脏了,但都换了还是有,但奇怪的是以前摸方法是也走过空白梯度鬼峰就没有了,但现在怎么重现都重现不出来,我本人觉得能不能把吸收波长选高一点干扰会少很多,但所做的一系列化合物大部分强吸收都在210-220该怎么办了,鬼峰太多真的无法做了
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没有跨不过的坎
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lufq

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
乙腈有问题,我的经验这一段时间乙腈不是很纯。
4楼2010-06-22 08:36:03
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lovefred

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
流动相是啥?水楼主要尤其注意。。要是梯度洗脱的话,考虑下是不是梯度设计的不适合。。而且梯度走低波长很麻烦。。很麻烦。。楼主考虑下是不是增高到220或者弄个等度的。。
2楼2010-06-21 21:00:51
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zpm1987

银虫 (小有名气)

流动相是乙腈和磷酸盐,觉得走的梯度还是挺倒得,0.0min    80的缓冲液,20的乙腈,30.0min   10的缓冲液,90的乙腈。
没有跨不过的坎
3楼2010-06-22 08:25:31
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liuquan7180

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
重复不出来我也觉得应该是试剂的问题 不会真的跟4楼大侠说的情况一样吧?
5楼2010-06-22 08:49:26
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