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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白溶液中咪唑浓度的问题
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xiaojing加油

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白溶液中咪唑浓度的问题

最近在做His-tag的蛋白纯化，最后elution buffer洗脱下了的蛋白中含有的咪唑，请问各位大侠，保存蛋白的时候需要去除咪唑的浓度吗？需要的话，改怎么样去除呢？
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1楼 2012-10-18 20:49:00
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
咪唑对蛋白质有刺激性，会影响蛋白活性。
1.除盐柱
2.超滤
3.透析
4.楼上朋友说的
等
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3楼2012-10-19 09:07:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
保存蛋白最好除去咪唑，因为咪唑的存在对很多下游实验都有影响。你可以透析除去咪唑，或者干脆直接用PEG沉淀蛋白，然后重新溶解在需要的buffer里。
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2楼2012-10-19 08:26:19
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
常用的就是除盐柱，快捷高效。我觉得其他的都没这个方便。
当然很娇弱的容易沉淀的蛋白除外。
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4楼2012-10-19 17:04:00
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