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xiaojing加油

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白溶液中咪唑浓度的问题

最近在做His-tag的蛋白纯化,最后elution buffer洗脱下了的蛋白中含有的咪唑,请问各位大侠,保存蛋白的时候需要去除咪唑的浓度吗?需要的话,改怎么样去除呢?
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
常用的就是除盐柱,快捷高效。我觉得其他的都没这个方便。
当然很娇弱的容易沉淀的蛋白除外。
4楼2012-10-19 17:04:00
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查看全部 4 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
保存蛋白最好除去咪唑,因为咪唑的存在对很多下游实验都有影响。你可以透析除去咪唑,或者干脆直接用PEG沉淀蛋白,然后重新溶解在需要的buffer里。
2楼2012-10-19 08:26:19
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yongbo_liang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
咪唑对蛋白质有刺激性,会影响蛋白活性。
1.除盐柱
2.超滤
3.透析
4.楼上朋友说的
3楼2012-10-19 09:07:07
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