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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 用苯酚硫酸法测定多糖含量
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zycold

新虫 (初入文坛)

[求助] 用苯酚硫酸法测定多糖含量

我使用苯酚硫酸法测定聚葡萄糖的多糖含量 ，过程按照国标进行，试剂都没问题，就是最后的结果都偏小，我想知道这是什么原因，加入浓硫酸后我剧烈震荡了，到瓶子发烫，结果还是低，不知道是什么原因，需要水浴加热么？
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1楼 2012-10-15 18:07:05
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
zycold: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 谢谢啦 我试试看啊 2012-10-18 18:39:18
引用回帖:
11楼: Originally posted by zycold at 2012-10-17 19:58:56
我想问下 这个为什么要沸水浴和冰水浴呢...

沸水浴 加快反应速度 也可以不水浴
冰水浴 迅速终止反应 方便风光光度发测量数值
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12楼2012-10-17 22:10:24
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hhz0104

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
注意浓硫酸加的时候不要沿壁，沿壁加会导致结果偏小
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6楼2012-10-16 20:27:44
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
yqbter: 金币+1, 很好的回复！ 2012-10-17 13:29:11
引用回帖:
4楼: Originally posted by zycold at 2012-10-16 18:37:57
苯酚溶液：4g/mL；
称取约0.25 g试样（精确至0.000 1g），用水溶解并定容至250mL，混匀后，用移液管吸取10.0mL，加水稀释并定容至250mL，此为试样液。
用移液管吸取2.0mL试样液和蒸馏水（作为空白），分别置于15 ...

我们实验室的数据

未命名.jpg



未命名2.jpg
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7楼2012-10-16 20:34:37
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普通回帖

看天

木虫 (知名作家)
顶一个 没用过这个方法 我们有时用DNS法 不过DNS也是很不准 LC最准吧
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2012-10-15 23:10:02
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
苯酚纯度
糖浓度本身就低
操作细节
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3楼2012-10-16 10:47:51
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zycold

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 毛桃就是我 at 2012-10-16 10:47:51
苯酚纯度
糖浓度本身就低
操作细节

苯酚溶液：4g/mL；
称取约0.25 g试样（精确至0.000 1g），用水溶解并定容至250mL，混匀后，用移液管吸取10.0mL，加水稀释并定容至250mL，此为试样液。
用移液管吸取2.0mL试样液和蒸馏水（作为空白），分别置于15 mL螺口小瓶中，分别加入0.12mL苯酚溶液，盖上瓶塞并轻轻混匀。打开瓶塞，迅速加入5.0mL硫酸。盖紧小瓶，剧烈摇匀。
小瓶在室温下保持45min，然后选择合适的分光光度计测定每一小瓶中溶液在490nm处的吸光值，测定时用加有蒸馏水的苯酚-硫酸混合液做空白参比。
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4楼2012-10-16 18:37:57
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zycold

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 看天 at 2012-10-15 23:10:02
顶一个 没用过这个方法 我们有时用DNS法 不过DNS也是很不准 LC最准吧

5楼2012-10-16 18:39:40
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zycold

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 毛桃就是我 at 2012-10-16 20:34:37
我们实验室的数据
8a/75/1473461_1350390866_449.jpg|2
未命名.jpg
1c/fb/1473461_1350390868_825.jpg|2
未命名2.jpg
...

你们漩涡振荡器转速能达到多少啊，你们震荡几分钟啊，我们全靠手摇，手都要折了，数据还是偏低，男生的数据就可以，先谢谢你的实验方法啊，我平均一个瓶子要摇400下，真心受不了啊
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8楼2012-10-17 12:07:47
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zycold

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hhz0104 at 2012-10-16 20:27:44
注意浓硫酸加的时候不要沿壁，沿壁加会导致结果偏小

这个确实是 我试过 慢慢加入值低的厉害，最后改用洗耳球直接把硫酸吹进去 我们的值应该在0.8--0.85  我的值一直在0.74-0.78间  还是低 不能用啊
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9楼2012-10-17 12:10:24
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by zycold at 2012-10-17 12:07:47
你们漩涡振荡器转速能达到多少啊，你们震荡几分钟啊，我们全靠手摇，手都要折了，数据还是偏低，男生的数据就可以，先谢谢你的实验方法啊，我平均一个瓶子要摇400下，真心受不了啊...

转速到没注意过 几秒钟时间吧
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10楼2012-10-17 14:46:58
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