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viviantuntun

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质样品溶液中离子浓度对蛋白质电泳的影响

利用分子筛进行蛋白质纯化时,选用的缓冲液是20mmol PBS 和0.1mol NaCl,收集的样品浓缩十倍后复溶进行蛋白电泳,那缓冲液中离子强度会不会影响蛋白电泳效果?非常感谢!!!

[ Last edited by viviantuntun on 2012-10-8 at 09:24 ]
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
viviantuntun: 金币+1, ★有帮助 2012-10-08 19:25:55
如果做SDS-PAGE的话,你的溶液有一点影响,但胶不会很难看。如果是做非变性胶的话,影响会比较大。
3楼2012-10-08 14:27:01
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lanziliuli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
viviantuntun: 金币+1, ★有帮助 2012-10-08 19:25:48
会有影响,导致电压上不去,电泳图中也可能会出现条纹
做好科研
2楼2012-10-08 10:51:45
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viviantuntun

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-08 14:27:01
如果做SDS-PAGE的话,你的溶液有一点影响,但胶不会很难看。如果是做非变性胶的话,影响会比较大。

我跑的是Tricine-SDS-PAGE,非变性胶和变性胶的区别是?谢谢!
4楼2012-10-08 16:10:00
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
viviantuntun: 金币+1, ★有帮助 2012-10-08 19:25:18
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-10-09 15:42:17
我上次试过将1ml的1*PBS的蛋白样品浓缩到50ul的样品去跑变性PAGE…………
结果点进去就发现不对劲,沉的特别快,然后跑电泳的时候发现悲剧了,点样孔里面的样品跑不出来,最后加大电压才勉强跑出来了,跑的时间也相应加长了,最后PAGE图好丑- -
一点实验经历,楼主参考……
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
5楼2012-10-08 16:29:55
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