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[求助]
各位毛细管电泳的师兄师姐好，哪位能帮帮忙
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各位虫虫师兄师姐好，偶是用毛细管电泳测蛋白的，但是突然之间，检测出现了异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这是为什么呢？ 另外，为什么做蛋白非得用ＤＴＴ或者β－巯基乙醇啊？能不能不用啊？他们到底是什么作用？很难闻耶，能不能不用啊？  |
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，因为图谱跟不加巯基乙醇差别很大，理解不了，能不能进一步讲解一下，谢谢啦
5楼2012-10-08 15:17:10
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+2, 感谢应助，欢迎常来~ 2012-09-28 09:01:34
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+2, 感谢应助，欢迎常来~ 2012-09-28 09:01:34
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ＤＴＴ或者β－巯基乙醇是用来防止氧化的，蛋白中有容易被氧化的二硫键等。 异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这样的问题你需要一点点排除问题。 我建议首先考察是否是蛋白吸附影响，即是否是柱子的问题，在用氢氧化钠冲洗柱后，用最稳定的硼砂缓冲液走DMSO，考察基线是否稳定。 如不是，可以考察是否是缓冲液问题，缓冲液配制久放后易生菌，建议重新配制后尝试。 还有一种可能就是样品的问题，蛋白变性，或蛋白溶液中长菌，建议使用新样品尝试。或者也可以使用同样的条件走BSA尝试，以排除柱子或缓冲液的问题。 |
2楼2012-09-28 08:57:36
padodo
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3楼2012-09-28 12:53:18
4楼2012-09-28 20:17:21
5