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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 各位毛细管电泳的师兄师姐好，哪位能帮帮忙
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klxts

新虫 (初入文坛)

[求助] 各位毛细管电泳的师兄师姐好，哪位能帮帮忙

各位虫虫师兄师姐好，偶是用毛细管电泳测蛋白的，但是突然之间，检测出现了异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这是为什么呢？

另外，为什么做蛋白非得用ＤＴＴ或者β－巯基乙醇啊？能不能不用啊？他们到底是什么作用？很难闻耶，能不能不用啊？
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1楼 2012-09-27 18:28:21
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guanguancow

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+2, 感谢应助，欢迎常来~ 2012-09-28 09:01:34
ＤＴＴ或者β－巯基乙醇是用来防止氧化的，蛋白中有容易被氧化的二硫键等。
异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这样的问题你需要一点点排除问题。
我建议首先考察是否是蛋白吸附影响，即是否是柱子的问题，在用氢氧化钠冲洗柱后，用最稳定的硼砂缓冲液走DMSO，考察基线是否稳定。
如不是，可以考察是否是缓冲液问题，缓冲液配制久放后易生菌，建议重新配制后尝试。
还有一种可能就是样品的问题，蛋白变性，或蛋白溶液中长菌，建议使用新样品尝试。或者也可以使用同样的条件走BSA尝试，以排除柱子或缓冲液的问题。
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2楼2012-09-28 08:57:36
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padodo

至尊木虫 (职业作家)

胖嘟嘟

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo: 金币+2, 您要常来 ^^ 2012-09-28 14:46:01
基线不稳，就换个毛细管吧，反正也很便宜
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我有什么能帮助您的吗？
3楼2012-09-28 12:53:18
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klxts

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guanguancow at 2012-09-28 08:57:36
ＤＴＴ或者β－巯基乙醇是用来防止氧化的，蛋白中有容易被氧化的二硫键等。
异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这样的问题你需要一点点排除问题。
我建议首先考察是否是蛋白吸附影响，即是否是柱子的问题，在用 ...

谢谢啦，好开心啊，又学到东西啦，谢谢谢谢
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4楼2012-09-28 20:17:21
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klxts

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guanguancow at 2012-09-28 08:57:36
ＤＴＴ或者β－巯基乙醇是用来防止氧化的，蛋白中有容易被氧化的二硫键等。
异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这样的问题你需要一点点排除问题。
我建议首先考察是否是蛋白吸附影响，即是否是柱子的问题，在用 ...

除了这两种物质，还有什么可以起到相同的作用吗？我的实验显示的结果让我感觉，巯基乙醇可以让蛋白质变性啊？当然只是猜测而已，因为图谱跟不加巯基乙醇差别很大，理解不了，能不能进一步讲解一下，谢谢啦
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5楼2012-10-08 15:17:10
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zpplkq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

巯基乙醇加少量是用来防止氧化的，加的过多就可以让蛋白质变性。
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6楼2012-10-15 15:55:39
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吴娟

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by klxts at 2012-10-08 15:17:10
除了这两种物质，还有什么可以起到相同的作用吗？我的实验显示的结果让我感觉，巯基乙醇可以让蛋白质变性啊？当然只是猜测而已，因为图谱跟不加巯基乙醇差别很大，理解不了，能不能进一步讲解一下，谢谢啦...

巯基乙醇是让你的蛋白还原用的  打开二硫键     一般都是加热70度以上让蛋白变性
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7楼2012-12-14 16:44:14
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931636060

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guanguancow at 2012-09-28 08:57:36
ＤＴＴ或者β－巯基乙醇是用来防止氧化的，蛋白中有容易被氧化的二硫键等。
异常现象，基线不稳定，像锯齿状一样，这样的问题你需要一点点排除问题。
我建议首先考察是否是蛋白吸附影响，即是否是柱子的问题，在用 ...

那蛋白质变形后，毛细管电泳的紫外谱图会不会有影响呢？
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8楼2012-12-14 18:52:35
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太学清议

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zpplkq at 2012-10-15 15:55:39
巯基乙醇加少量是用来防止氧化的，加的过多就可以让蛋白质变性。

你好，新注册的没办法发帖，有个问题想请教下，谢谢。实验部分已经完事，得到毛细管电泳峰图都是DAT文件，怎么处理这样图，应用到文章上？？谢谢。
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9楼2018-11-09 10:58:19
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