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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近做的菌落pcr，可以做胶回收吗？
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Zedone

木虫 (正式写手)
如果没有拖尾的话是可以的，但是你的有拖尾。那就不好搞了
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

weining1203
11楼2012-09-26 14:42:25
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以回收，T-A克隆，继续做
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

weining1203
我们的心憧憬着未来，有的时候，现实也许会令我们沮丧，但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的，而那些逝去的，终将变得可爱和美好。
12楼2012-09-26 15:04:56
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dzjlm0207
13楼2012-09-26 15:08:25
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weining1203

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by Zedone at 2012-09-26 14:42:25
如果没有拖尾的话是可以的，但是你的有拖尾。那就不好搞了

谢谢
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14楼2012-09-26 15:46:41
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weining1203

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by wdlnjau at 2012-09-26 15:04:56
可以回收，T-A克隆，继续做

谢谢
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15楼2012-09-26 15:46:55
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-27 13:49:45
菌液的背景不纯因为太多杂质了。如果可以的话提取菌的DNA再去做扩增，可能会好一点。在因为两端直接设计酶切位点就可以了。
如果条带那么强，可以直接割胶回收的。如果懒得重新设计引物，可以看看现成的T载体里有没有你想要的酶切位点，有的话直接连到T载体中再提取质粒双酶切也可以。不过也是挺折腾的~
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

weining1203
你的日子如何，你的力量也必如何！
16楼2012-09-27 09:29:48
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-27 13:49:55
一般是不用菌落PCR产物做回收的，但是我看你的PCR产物很亮，应该可以做回收，可以拿2%的琼脂糖胶慢慢跑，把条带完全跑开之后割胶回收应该没问题
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17楼2012-09-27 09:41:03
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david0308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请问你为什么要在菌落PCR的胶上做回收呢？要干什么呢？我觉得没有意义啊，菌落PCR也就只能起到鉴定的作用而已，想不通
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哈哈
18楼2012-09-27 13:52:09
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
完全可以切胶回收，无需优化。菌落浓度太高里面含蛋白量高及模板浓度太高容易造成拖尾。
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19楼2012-09-27 15:07:50
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以做回收的，如果引物特异性不高，会出杂带，但是只要目的带出现了就好了，提取基因组DNA不见得能减少多少杂带
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20楼2012-09-29 09:25:34
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