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Zedone

木虫 (正式写手)

如果没有拖尾的话是可以的,但是你的有拖尾。那就不好搞了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

11楼2012-09-26 14:42:25
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以回收,T-A克隆,继续做

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

我们的心憧憬着未来,有的时候,现实也许会令我们沮丧,但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的,而那些逝去的,终将变得可爱和美好。
12楼2012-09-26 15:04:56
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13楼2012-09-26 15:08:25
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weining1203

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
11楼: Originally posted by Zedone at 2012-09-26 14:42:25
如果没有拖尾的话是可以的,但是你的有拖尾。那就不好搞了

谢谢
14楼2012-09-26 15:46:41
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weining1203

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by wdlnjau at 2012-09-26 15:04:56
可以回收,T-A克隆,继续做

谢谢
15楼2012-09-26 15:46:55
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-27 13:49:45
菌液的背景不纯因为太多杂质了。如果可以的话提取菌的DNA再去做扩增,可能会好一点。在因为两端直接设计酶切位点就可以了。
如果条带那么强,可以直接割胶回收的。如果懒得重新设计引物,可以看看现成的T载体里有没有你想要的酶切位点,有的话直接连到T载体中再提取质粒双酶切也可以。不过也是挺折腾的~

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

你的日子如何,你的力量也必如何!
16楼2012-09-27 09:29:48
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ilyzp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-27 13:49:55
一般是不用菌落PCR产物做回收的,但是我看你的PCR产物很亮,应该可以做回收,可以拿2%的琼脂糖胶慢慢跑,把条带完全跑开之后割胶回收应该没问题
17楼2012-09-27 09:41:03
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david0308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请问你为什么要在菌落PCR的胶上做回收呢?要干什么呢?我觉得没有意义啊,菌落PCR也就只能起到鉴定的作用而已,想不通
哈哈
18楼2012-09-27 13:52:09
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
完全可以切胶回收,无需优化。菌落浓度太高里面含蛋白量高及模板浓度太高容易造成拖尾。
19楼2012-09-27 15:07:50
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以做回收的,如果引物特异性不高,会出杂带,但是只要目的带出现了就好了,提取基因组DNA不见得能减少多少杂带
20楼2012-09-29 09:25:34
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