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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 最近做的菌落pcr，可以做胶回收吗？
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weining1203

新虫 (小有名气)

[求助] 最近做的菌落pcr，可以做胶回收吗？ 已有1人参与

如标题，最近跑的菌落pcr，1-3有拖尾和弥散，但是目的带很亮，产生这种现象的原因是什么啊，杂质比较多吗；4和5的模板是DNA，不是菌落，目的带比较弱，小弟想问一下1-3可不可做胶回收然后连T载体做克隆啊，还要优化pcr条件吗？

eric 2012-09-25 21hr 01min1.jpg
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1楼 2012-09-26 09:35:38
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以做回收的，如果引物特异性不高，会出杂带，但是只要目的带出现了就好了，提取基因组DNA不见得能减少多少杂带
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20楼2012-09-29 09:25:34
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌液PCR这种情况正常，可以切胶回收后接着做克隆！
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低调稳重务实内敛---------------残
2楼2012-09-26 09:44:39
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
菌落PCR杂质多，不建议回收做克隆。做连用不了多少DNA的，回收多了也没用，一般50ul的PCR产物足以。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

weining1203
3楼2012-09-26 09:48:18
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weining1203

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-09-26 09:48:18
菌落PCR杂质多，不建议回收做克隆。做连用不了多少DNA的，回收多了也没用，一般50ul的PCR产物足以。

谢谢回复，您好楼上的说的相反，有点迷茫啊
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4楼2012-09-26 10:11:30
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