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DXY1

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质阳离子交换

本人用的是GE公司的CM FF阳离子交换柱,最近做蛋白质纯化的实验
以下是我的纯化图
想请问,
1.在图中为什么又直上的峰值出现,而不是像一般的纯化图,上升有一定的斜率
2.在两个峰值间为什么,UV值波动很大,导致出现粗的线条
(蓝色是UV值,红色是离子强度)

2.jpg
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上样量太少或者电荷的问题,蛋白没有挂柱,峰值还不到0.4,UV检测也可能有问题。建议:1.检查UV检测器。2.提高蛋白含量。3.缓冲液PH,等电点问题
我们的心憧憬着未来,有的时候,现实也许会令我们沮丧,但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的,而那些逝去的,终将变得可爱和美好。
5楼2012-09-22 16:43:24
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-09-20 05:06:11
不知道你用什么仪器纯化的?拉线型?UV检测器是不是有问题?
说一下你的条件。
2楼2012-09-19 16:55:33
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生物-TJAB

新虫 (小有名气)

没见过啊!感觉像是uv检测器不正常啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2012-09-19 23:58:15
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的是Bio-Rad的纯化仪吧,可能你样品里没蛋白,上柱洗脱吸收很低,就这样
关注我关注的
4楼2012-09-21 19:06:58
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