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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白质阳离子交换
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DXY1

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质阳离子交换

本人用的是GE公司的CM FF阳离子交换柱，最近做蛋白质纯化的实验
以下是我的纯化图
想请问，
1.在图中为什么又直上的峰值出现，而不是像一般的纯化图，上升有一定的斜率
2.在两个峰值间为什么，UV值波动很大，导致出现粗的线条
（蓝色是UV值，红色是离子强度）

2.jpg
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1楼 2012-09-19 15:23:52
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2012-09-20 05:06:11
不知道你用什么仪器纯化的？拉线型？UV检测器是不是有问题？
说一下你的条件。
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2楼2012-09-19 16:55:33
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生物-TJAB

新虫 (小有名气)
没见过啊！感觉像是uv检测器不正常啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2012-09-19 23:58:15
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用的是Bio-Rad的纯化仪吧，可能你样品里没蛋白，上柱洗脱吸收很低，就这样
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4楼2012-09-21 19:06:58
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上样量太少或者电荷的问题，蛋白没有挂柱，峰值还不到0.4，UV检测也可能有问题。建议：1.检查UV检测器。2.提高蛋白含量。3.缓冲液PH，等电点问题
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我们的心憧憬着未来，有的时候，现实也许会令我们沮丧，但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的，而那些逝去的，终将变得可爱和美好。
5楼2012-09-22 16:43:24
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wdlnjau

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

上样量太少或者电荷的问题，蛋白没有挂柱，峰值还不到0.4，UV检测也可能有问题。建议：1.检查UV检测器。2.提高蛋白含量。3.缓冲液PH，等电点问题
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我们的心憧憬着未来，有的时候，现实也许会令我们沮丧，但是这一切都是暂时的、转瞬即逝的，而那些逝去的，终将变得可爱和美好。
6楼2012-09-22 16:43:47
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