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wangchao_207

金虫 (小有名气)

[求助] 关于蛋白质透析所遇到的问题

我的蛋白质经过硫酸铵沉淀后用蒸馏水透析(无搅拌)三天,可是发现蛋白质沉淀了,很困惑这是什么原因,求大神解释,我担心离心后上清液中不会再有我的目的蛋白,是不是蛋白质透析时间太长了?
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加油吧奋斗吧
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wangchao_207

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 华俊 at 2012-09-11 00:12:33
如果后续试验允许的话,最好是使用缓冲液透析的,最常用的是PBS吧,这样也能保持蛋白活性,
楼主低盐透析莫非是用于标记吗...

不是,这是我的目的蛋白的粗提,我只是要分离纯化我的目的蛋白
加油吧奋斗吧
7楼2012-09-11 08:08:36
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xuyihui2001

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 有道理 2012-09-11 07:03:06
好像要用buffer 透析,用水是否太剧烈,而且如果你的蛋白浓度大更容易沉淀!我建议你逐步改变溶液浓度,蛋白浓度不要太大!
2楼2012-09-10 13:00:35
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wangchao_207

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xuyihui2001 at 2012-09-10 13:00:35
好像要用buffer 透析,用水是否太剧烈,而且如果你的蛋白浓度大更容易沉淀!我建议你逐步改变溶液浓度,蛋白浓度不要太大!

我是把得到的沉淀溶于少量的蒸馏水中,然后再用蒸馏水透析,每次蛋白质都沉淀了,很郁闷,不知怎么搞得,我试试,谢谢
加油吧奋斗吧
3楼2012-09-10 13:43:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢分享经验 2012-09-11 07:03:20
有些本来就是胶体或者暂时没有沉淀下去的东西,久了会沉淀的,我遇到过相似的情况。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2012-09-10 19:44:26
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