24小时热门版块排行榜    

查看: 1221  |  回复: 3

蛋白之家

新虫 (小有名气)

[求助] 表达载体的问题 和表达载体连接后的检测问题

为什么连表达载体后挑斑,结果菌液PCR没有东西,提质粒基本上都有 但是提的质粒条带很奇怪,请大家帮忙分析一下,见图
本来连好的载体应该是6000左右的条带,可是现在提的质粒有1500左右的一条带,另外一条是10000以上的条带,能不能帮忙分析一下原因   谢谢

9.1质粒检测.JPG.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 专家考核, 辛苦了 2012-09-04 13:39:58
有杂带很正常啊。。。
PCR都没有P出来,应该不对;
现在质粒大小有问题,你酶切一下,因为跑出来的条带都是超螺旋状态,肯定小了。。。而你的质粒是6k,是线性的。。。
酶切如果不对。。。冲刺呢连接吧!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2012-09-03 23:03:42
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蛋白之家

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2012-09-03 23:03:42
有杂带很正常啊。。。
PCR都没有P出来,应该不对;
现在质粒大小有问题,你酶切一下,因为跑出来的条带都是超螺旋状态,肯定小了。。。而你的质粒是6k,是线性的。。。
酶切如果不对。。。冲刺呢连接吧!

谢谢
3楼2012-09-04 08:53:29
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我目前也遇到了楼主这样的问题,连接后应该是6300的载体,结果跑质粒跑出两根条带,一根4500,一根2000多点,没道理一根是载体,一根是目的片段吧……
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
4楼2012-09-04 08:56:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蛋白之家 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 9/450 2026-08-01 15:50 by y4XuShGyllvT
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 11/550 2026-08-01 15:43 by y4XuShGyllvT
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 11/550 2026-08-01 15:43 by y4XuShGyllvT
[基金申请] 小木虫看见有人已经知道结果了 +17 1234567wang 2026-07-25 22/1100 2026-08-01 15:43 by iaeyuan
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 8/400 2026-08-01 15:42 by y4XuShGyllvT
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jzg3xk1po8 2026-07-31 11/550 2026-08-01 15:40 by y4XuShGyllvT
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +16 低垂的野花 2026-07-31 21/1050 2026-08-01 15:35 by jklily
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +15 布布和一二 2026-07-30 19/950 2026-08-01 15:18 by 40862026
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +14 wangze12014 2026-07-28 18/900 2026-07-31 18:35 by lzchaihuo
[教师之家] 基础研究怎么拉横向,学校到款任务越来越多,难以完成 拉横向,都有哪些途径啊 +8 锦衣卫寒战 2026-07-28 8/400 2026-07-31 18:13 by beefly
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液,是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[考博] 申请2027年材料/化学类博士 10+3 考研老狗? 2026-07-25 5/250 2026-07-30 19:33 by 白色木鱼
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
[有机交流] 产物和副产物价值比较 30+4 小汤02 2026-07-27 5/250 2026-07-30 12:44 by czyzsu
[基金申请] 时间戳他又来了 +14 晓晓爱翠翠 2026-07-26 17/850 2026-07-29 16:30 by 呵呵二哥
[有机交流] 这个自发加氧反应的机理是什么? 50+4 YUAN2273 2026-07-25 7/350 2026-07-29 12:27 by xiaobenpu
[基金申请] 这种情况还有戏吗 +5 drbart 2026-07-27 11/550 2026-07-29 05:50 by drbart
[基金申请] 同事接到电话了,我却没有 +4 1234567wang 2026-07-27 4/200 2026-07-28 10:11 by GOODLUCKER
[基金申请] 准备明年的基金了 +5 Tide man 2026-07-27 5/250 2026-07-28 09:25 by newfuzzy1
[分析] 水蒸气蒸馏法乳化现象 +3 月光娇娇 2026-07-26 3/150 2026-07-26 23:25 by caiyun
信息提示
请填处理意见