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fengye289

禁虫 (初入文坛)

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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

第一个和第三个问题
爱是浅浅的喜欢,喜欢是浅浅的爱。
3楼2012-09-05 17:45:42
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-09-06 13:40:38
对于第一个问题 既然你扩出来了说明整个流程是没什么问题的,你可以适当降低退火温度或者提高mg离子浓度,或者换个新的buffer(buffer反复冻融会影响效果)。最好的方法是RE-CON后切胶纯化。
     对于第二个问题buffer的作用一般是为酶促反应提供最适反应环境。既然你扩出来了就说明所有试剂没有问题。      
    对于第三个问题你所指的延长时间是指那一段时间(预变性时间,变性时间,退火时间,延伸时间还是最终延伸时间)。
   第四个问题LZ的第一个问题和第四个问题有点矛盾,前者很暗后者没有扩出来。
爱是浅浅的喜欢,喜欢是浅浅的爱。
2楼2012-09-05 17:44:07
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dxli1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

GC含量高可用LAtaq酶,延伸时间过长,可能P出比目的条带长的非特异性条带。
逆水行舟,不进则退。
4楼2012-09-06 23:44:48
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