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fengye289

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2012-09-03 15:40:00
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-09-06 13:40:38
对于第一个问题 既然你扩出来了说明整个流程是没什么问题的，你可以适当降低退火温度或者提高mg离子浓度，或者换个新的buffer（buffer反复冻融会影响效果）。最好的方法是RE-CON后切胶纯化。
     对于第二个问题buffer的作用一般是为酶促反应提供最适反应环境。既然你扩出来了就说明所有试剂没有问题。      
    对于第三个问题你所指的延长时间是指那一段时间（预变性时间，变性时间，退火时间，延伸时间还是最终延伸时间）。
   第四个问题LZ的第一个问题和第四个问题有点矛盾，前者很暗后者没有扩出来。
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爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
2楼2012-09-05 17:44:07
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

第一个和第三个问题
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爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
3楼2012-09-05 17:45:42
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dxli1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

GC含量高可用LAtaq酶，延伸时间过长，可能P出比目的条带长的非特异性条带。
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逆水行舟，不进则退。
4楼2012-09-06 23:44:48
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