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Lynn和Mia金虫 (小有名气)
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[求助]
求助求助~~设计引物有多少分类？分别适用于什么情况？
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| 各位实验达人，我最近在做real time PCR，先提取总mRNA，再反转录成单链cDNA，最后做荧光定量PCR，最近设计引物的时候发现有人说的什么设计跨内含子的引物，我就不太明白了，希望各位达人给予解惑，什么是跨内含子的引物？为什么要设计这样的引物？引物设计有哪些分类？我应该设计哪一种引物呢？非常困惑+迷茫ing~~~望指教~~~非常感谢O(∩_∩)O哈！ |
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金虫 (初入文坛)
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【答案】应助回帖
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小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-11-14 16:29:44
Lynn和Mia: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-11-15 09:49:41
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-11-14 16:29:44
Lynn和Mia: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-11-15 09:49:41
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个人认为，跨内含子引物，就是说是说上游引物或者下游引物中的一条同时落在两个外显子上，不含有内含子序列，因为mRNA不含有内含子，这样设计的引物只能检测出mRNA，而不能检测出基因组，对mRNA的定量就相对准确。所以设计引物的时候就要限定一下上下游引物的位置了。 至于引物种类，这个问题我不怎么明白你要问的是什么，荧光定量的引物设计原则很多地方都可以搜到的。祝你好运吧 |
4楼2012-11-14 13:34:12
Lynn和Mia
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2楼2012-09-03 14:49:35
3楼2012-11-13 15:52:43
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5楼2012-11-15 09:48:47
