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Lynn和Mia金虫 (小有名气)
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[求助]
求助求助~~设计引物有多少分类?分别适用于什么情况?
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| 各位实验达人,我最近在做real time PCR,先提取总mRNA,再反转录成单链cDNA,最后做荧光定量PCR,最近设计引物的时候发现有人说的什么设计跨内含子的引物,我就不太明白了,希望各位达人给予解惑,什么是跨内含子的引物?为什么要设计这样的引物?引物设计有哪些分类?我应该设计哪一种引物呢?非常困惑+迷茫ing~~~望指教~~~非常感谢O(∩_∩)O哈! |
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【答案】应助回帖
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个人认为,跨内含子引物,就是说是说上游引物或者下游引物中的一条同时落在两个外显子上,不含有内含子序列,因为mRNA不含有内含子,这样设计的引物只能检测出mRNA,而不能检测出基因组,对mRNA的定量就相对准确。所以设计引物的时候就要限定一下上下游引物的位置了。 至于引物种类,这个问题我不怎么明白你要问的是什么,荧光定量的引物设计原则很多地方都可以搜到的。祝你好运吧 |
4楼2012-11-14 13:34:12
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