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staumter

新虫 (初入文坛)

[交流] 测定MIC、MBC,培养基的影响有多大? 已有4人参与

做一种抗菌肽,按照前人在nature上的文献,抗菌效果还是不错的
但是自己做死活没有效果

做了G-\G+的常用标准菌株
也用了金霉素、新霉素和粘菌素做对比
用的进口的MH培养基

当时认为这种抗菌肽是否和dorf管材质PP有反应,用专用的棕色玻璃瓶配制,结果相同;后又怀疑降解,不仅用2批抗菌肽对比试验,也跑了电泳,没有降解,效果相同;最后,一个以前做过的师姐说,她当时用的BD的MHB培养基,是去钙镁离子的

虽然还是订购了那个培养基,等着做试验,我有点儿想不通:
1 我所有抗生素的效果虽然不是特别好,但是也不差,顶多前人是0.5,我是1,敏感性稍弱?但是不可能把一个4的抗菌肽做成128也没有效果。我认为总体的试验过程还是靠谱的。
2 作为肽类物质,再娇贵,也不止于此啊。能和PP有反应,那以后这玩意怎么保存啊?
3 我不理解用去钙镁离子的培养基意义何在?增加细菌的敏感性?提升测定的敏感度?但是抗生素可以,抗菌肽不可以,这还有什么意义咧?这最多略微影响结果的数值高低,但不能改变趋势啊?!
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山高水远

新虫 (小有名气)

★
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OD600一般调至在0.1左右,具体操作时候还要进行稀释。
6楼2015-04-17 08:53:13
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skymao007

禁虫 (正式写手)

★
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2楼2012-08-27 14:32:06
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staumter

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by skymao007 at 2012-08-27 14:32:06
那可能就是你操作上还有问题,我是做中药抗菌活性的,你的菌落数大概是多少,个人感觉如果cfu对应OD600超过0.2就会出现参差不齐的情况

我不理解“cfu对应OD600超过0.2”这句话。
我的OD600基本控制在0.5~0.6这个范围,而且所有抗生素和抗菌肽都是用同一批菌悬液做的,做了好几种菌株了,结果相近,都是金霉素最好,其他两种抗生素稍差,应该不是你所说的参差不齐吧?
我菌悬液同时10倍稀释4次,然后点板计数,基本都是2次稀释的计数200以内,3次稀释的计数不到30.
但是cfu和OD600是怎么划等号的?不解~俺是菜鸟。
3楼2012-08-28 16:30:45
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miaoxin

禁虫 (正式写手)

★
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4楼2014-02-20 00:51:30
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