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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细菌不同时期培养基成分测定
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daqwu

木虫 (小有名气)

[求助] 细菌不同时期培养基成分测定

小弟最近投一篇文章，研究不同温度下假单胞菌基因表达变化，审稿人提出要排除培养基成分的影响，让我测一下细菌培养基不同处理中（摇瓶培养，测的是对数后期）的中主要成分会不会存在差异，想问下各位该用什么方法测？是不是要测还原糖，氨基N元素等含量？可有具体方法，有没有单位可以帮助检测的？十分感谢！
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1楼 2012-07-02 20:06:51
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l68266152

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
daqwu: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢指导！ 2012-07-03 09:09:05
你用的什么质粒？什么培养基呢？如果是LB的话，就测个N吧，有试剂盒的。其实我觉得这个参数对你的实验意义不大，最好用对照实验证明培养基成分对表达没有影响，或者有影响，就可以了
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相信自己
2楼2012-07-03 08:27:47
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zhoucb
3楼2012-07-03 08:55:37
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daqwu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by l68266152 at 2012-07-03 08:27:47
你用的什么质粒？什么培养基呢？如果是LB的话，就测个N吧，有试剂盒的。其实我觉得这个参数对你的实验意义不大，最好用对照实验证明培养基成分对表达没有影响，或者有影响，就可以了

我们是分析的就是野生型菌，没有质粒，培养基是LB。在不同温度条件下，相同生长状态的细菌（OD5-6），审稿人说得排除两个温度下的培养基成分的差异造成的影响，所以要测下，只测个N可以吗？对照应该怎么设置？
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4楼2012-07-03 09:27:59
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xiaoqing518

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
daqwu: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-07-03 19:40:36
这个还是得看检测的物质对菌种的影响。要不怎么检测？培养基中的成分那么复杂，检测不过来啊
先根据文献，确定那些物质可能有影响，然后再去做
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5楼2012-07-03 11:13:23
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north_coco887

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
daqwu: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-07-03 19:40:08
测个总N，测个残糖就可以吧（蛋白胨酵母粉里是有残糖的）？温差不大的话，可能真没大有必要。
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6楼2012-07-03 11:58:06
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daqwu

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by north_coco887 at 2012-07-03 11:58:06
测个总N，测个残糖就可以吧（蛋白胨酵母粉里是有残糖的）？温差不大的话，可能真没大有必要。

温度相差9度，我们也是觉得没有必要。那请问测定总N和残糖的方法是什么？
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7楼2012-07-03 19:43:35
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north_coco887

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
daqwu: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-07-04 16:41:44
引用回帖:
7楼: Originally posted by daqwu at 2012-07-03 19:43:35
温度相差9度，我们也是觉得没有必要。那请问测定总N和残糖的方法是什么？...

测总氮可以凯氏定氮哈，c的记不清了，好像是碳谱。北大那边有个分析中心，你可以打电话问下，需要用什么仪器测，不贵，比我们学校服务好很多，嘿嘿。
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8楼2012-07-04 16:13:06
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swnz

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
daqwu: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-07-04 22:03:27
感觉审稿人有点过分。不过，楼主要有有说服力的对照才行，既然是考察不同温度下菌的表达的变化，如果是测定产物的话，一方面要测定表达产物是怎么变化的，另一方面，应该有直接相关的酶的活性的变化情况作为支撑。楼主看有没有酶学的支撑数据，如果有的话，先给审稿人交流一下看怎么样。
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跟着感觉走
9楼2012-07-04 20:01:33
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