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staumter

新虫 (初入文坛)

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[交流] 测定MIC、MBC，培养基的影响有多大？已有4人参与

做一种抗菌肽，按照前人在nature上的文献，抗菌效果还是不错的
但是自己做死活没有效果

做了G-\G+的常用标准菌株
也用了金霉素、新霉素和粘菌素做对比
用的进口的MH培养基

当时认为这种抗菌肽是否和dorf管材质PP有反应，用专用的棕色玻璃瓶配制，结果相同；后又怀疑降解，不仅用2批抗菌肽对比试验，也跑了电泳，没有降解，效果相同；最后，一个以前做过的师姐说，她当时用的BD的MHB培养基，是去钙镁离子的

虽然还是订购了那个培养基，等着做试验，我有点儿想不通：
1 我所有抗生素的效果虽然不是特别好，但是也不差，顶多前人是0.5，我是1，敏感性稍弱？但是不可能把一个4的抗菌肽做成128也没有效果。我认为总体的试验过程还是靠谱的。
2 作为肽类物质，再娇贵，也不止于此啊。能和PP有反应，那以后这玩意怎么保存啊？
3 我不理解用去钙镁离子的培养基意义何在？增加细菌的敏感性？提升测定的敏感度？但是抗生素可以，抗菌肽不可以，这还有什么意义咧？这最多略微影响结果的数值高低，但不能改变趋势啊？！

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1楼 2012-08-27 14:12:34

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skymao007

禁虫 (正式写手)

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2楼2012-08-27 14:32:06

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staumter

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引用回帖:

2楼: Originally posted by skymao007 at 2012-08-27 14:32:06
那可能就是你操作上还有问题，我是做中药抗菌活性的，你的菌落数大概是多少，个人感觉如果cfu对应OD600超过0.2就会出现参差不齐的情况

我不理解“cfu对应OD600超过0.2”这句话。
我的OD600基本控制在0.5~0.6这个范围，而且所有抗生素和抗菌肽都是用同一批菌悬液做的，做了好几种菌株了，结果相近，都是金霉素最好，其他两种抗生素稍差，应该不是你所说的参差不齐吧？
我菌悬液同时10倍稀释4次，然后点板计数，基本都是2次稀释的计数200以内，3次稀释的计数不到30.
但是cfu和OD600是怎么划等号的？不解~俺是菜鸟。