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南海所老龚

新虫 (正式写手)

[求助] 线粒体基因控制区CR含重复序列，为什么PCR产物直接测序不准，而要纯化或者克隆再测序 已有1人参与

各位虫友好！
我是做鱼类线粒体基因的，提，问题如题：线粒体基因控制区CR含重复序列，为什么PCR产物直接测序不准，而要纯化或者克隆再测序？希望大家多交流，谢谢！
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
1楼 2012-08-27 09:22:08
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stoni

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

与酶、PCR反应有关。在重复序列区，PCR过程中容易造成滑链，导致扩增产物长度不一，PCR产物最后实际是长度不等的混合物。如果直接测序，会出现重叠峰。如果克隆测序，则是单一片段，测序为单峰。
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13楼2014-12-20 16:00:56
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