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南海所老龚

新虫 (正式写手)

[求助] 线粒体基因控制区CR含重复序列,为什么PCR产物直接测序不准,而要纯化或者克隆再测序已有1人参与

各位虫友好!
我是做鱼类线粒体基因的,提,问题如题:线粒体基因控制区CR含重复序列,为什么PCR产物直接测序不准,而要纯化或者克隆再测序?希望大家多交流,谢谢!
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测序相关问题 重复序列PCR扩增

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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
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stoni

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

与酶、PCR反应有关。在重复序列区,PCR过程中容易造成滑链,导致扩增产物长度不一,PCR产物最后实际是长度不等的混合物。如果直接测序,会出现重叠峰。如果克隆测序,则是单一片段,测序为单峰。
13楼2014-12-20 16:00:56
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