24小时热门版块排行榜    

查看: 2012  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

祥云赵

金虫 (小有名气)

[求助] 苹果酶活性测定中无活性,为什么?

Sample Text
用氮蓝四唑法测定苹果SOD酶活性(负值),双氧水法测CAT酶活性,愈创木酚法测POD酶活性时,吸光值一直没有变化,为什么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wbx0412

至尊木虫 (职业作家)


树树8013: 金币+1, 谢谢回帖解答交流,欢迎常来 2012-08-22 22:17:33
引用回帖:
4楼: Originally posted by 祥云赵 at 2012-08-22 16:11:40
附上具体方法:
1、粗酶液提取,取1g叶片放于预冷的研钵中,并加入8ml 50mmol/LpH=7.8(内含1%pvp)的磷酸缓冲液(LpH=7.8)在冰浴下研磨成浆,将其转移至10ml离心管中,4度下8000转离心10min,上清液即粗酶液。
2 ...

PVP的量调整一下,我测过黑莓中的β-糖苷酶,时加了PVP反而测不出来。楼主可以考虑一下,或者将粗酶浓缩,提高酶的加入量等方法
5楼2012-08-22 16:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

miaomiaomao

金虫 (小有名气)


树树8013: 金币+1, 欢迎新虫有发帖交流,欢迎~欢迎~ 2012-08-22 22:14:51
我测定过其他的酶,也出现这种情况,我猜想是不是我的酶抑制剂浓度太高了,刚把酶加进去它就给阻止了
吃嘛嘛香
2楼2012-08-22 11:29:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请lz帮具体的实验操作方法写出来便于大家分析。
我猜是lz是提取酶时pvp加的量不够,苹果中多酚含量较高,一般的方法可能有局限。
3楼2012-08-22 15:22:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

祥云赵

金虫 (小有名气)

附上具体方法:
1、粗酶液提取,取1g叶片放于预冷的研钵中,并加入8ml 50mmol/LpH=7.8(内含1%pvp)的磷酸缓冲液(LpH=7.8)在冰浴下研磨成浆,将其转移至10ml离心管中,4度下8000转离心10min,上清液即粗酶液。
2、SOD活性测定,测定管中加入1.5ml磷酸缓冲液,0.3ml130mmolMet溶液,0.3ml750umolNBT溶液,100umol/L EDTA-Na2溶液0.3ml,蒸馏水0.5ml(光下对照和暗中对照0.6ml),0.1ml粗酶液,20umol/L核黄素0.3ml(最后加),光下显色反应15min,以暗中对照调零,测定各处理吸光值。
4楼2012-08-22 16:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 281求调剂(0805) +3 烟汐忆海 2026-03-16 7/350 2026-03-17 20:16 by peike
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 341求调剂 +5 捣蛋猪猪 2026-03-11 7/350 2026-03-17 19:09 by 捣蛋猪猪
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +3 小李0854 2026-03-16 3/150 2026-03-17 13:40 by 热情沙漠
[考研] 东南大学364求调剂 +5 JasonYuiui 2026-03-15 5/250 2026-03-16 21:28 by 木瓜膏
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 311求调剂 +5 26研0 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:21 by a不易
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 一志愿华中师范071000,325求调剂 +6 RuitingC 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:50 by 可淡不可忘
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:27 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
信息提示
请填处理意见