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祥云赵

金虫 (小有名气)

[求助] 苹果酶活性测定中无活性,为什么?

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用氮蓝四唑法测定苹果SOD酶活性(负值),双氧水法测CAT酶活性,愈创木酚法测POD酶活性时,吸光值一直没有变化,为什么?
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wbx0412

至尊木虫 (职业作家)


树树8013: 金币+1, 谢谢回帖解答交流,欢迎常来 2012-08-22 22:17:33
引用回帖:
4楼: Originally posted by 祥云赵 at 2012-08-22 16:11:40
附上具体方法:
1、粗酶液提取,取1g叶片放于预冷的研钵中,并加入8ml 50mmol/LpH=7.8(内含1%pvp)的磷酸缓冲液(LpH=7.8)在冰浴下研磨成浆,将其转移至10ml离心管中,4度下8000转离心10min,上清液即粗酶液。
2 ...

PVP的量调整一下,我测过黑莓中的β-糖苷酶,时加了PVP反而测不出来。楼主可以考虑一下,或者将粗酶浓缩,提高酶的加入量等方法
5楼2012-08-22 16:52:09
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