24小时热门版块排行榜    

查看: 2331  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

祥云赵

金虫 (小有名气)

[求助] 苹果酶活性测定中无活性,为什么?

Sample Text
用氮蓝四唑法测定苹果SOD酶活性(负值),双氧水法测CAT酶活性,愈创木酚法测POD酶活性时,吸光值一直没有变化,为什么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

祥云赵

金虫 (小有名气)

附上具体方法:
1、粗酶液提取,取1g叶片放于预冷的研钵中,并加入8ml 50mmol/LpH=7.8(内含1%pvp)的磷酸缓冲液(LpH=7.8)在冰浴下研磨成浆,将其转移至10ml离心管中,4度下8000转离心10min,上清液即粗酶液。
2、SOD活性测定,测定管中加入1.5ml磷酸缓冲液,0.3ml130mmolMet溶液,0.3ml750umolNBT溶液,100umol/L EDTA-Na2溶液0.3ml,蒸馏水0.5ml(光下对照和暗中对照0.6ml),0.1ml粗酶液,20umol/L核黄素0.3ml(最后加),光下显色反应15min,以暗中对照调零,测定各处理吸光值。
4楼2012-08-22 16:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

miaomiaomao

金虫 (小有名气)

★
树树8013: 金币+1, 欢迎新虫有发帖交流,欢迎~欢迎~ 2012-08-22 22:14:51
我测定过其他的酶,也出现这种情况,我猜想是不是我的酶抑制剂浓度太高了,刚把酶加进去它就给阻止了
吃嘛嘛香
2楼2012-08-22 11:29:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
请lz帮具体的实验操作方法写出来便于大家分析。
我猜是lz是提取酶时pvp加的量不够,苹果中多酚含量较高,一般的方法可能有局限。
3楼2012-08-22 15:22:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wbx0412

至尊木虫 (职业作家)

★
树树8013: 金币+1, 谢谢回帖解答交流,欢迎常来 2012-08-22 22:17:33
引用回帖:
4楼: Originally posted by 祥云赵 at 2012-08-22 16:11:40
附上具体方法:
1、粗酶液提取,取1g叶片放于预冷的研钵中,并加入8ml 50mmol/LpH=7.8(内含1%pvp)的磷酸缓冲液(LpH=7.8)在冰浴下研磨成浆,将其转移至10ml离心管中,4度下8000转离心10min,上清液即粗酶液。
2 ...

PVP的量调整一下,我测过黑莓中的β-糖苷酶,时加了PVP反而测不出来。楼主可以考虑一下,或者将粗酶浓缩,提高酶的加入量等方法
5楼2012-08-22 16:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 13/650 2026-11-09 06:50 by l48hFd8Nwae2
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 06:43 by l48hFd8Nwae2
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 05:26 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +10 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 22/1100 2026-11-06 17:18 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 12/600 2026-11-06 05:32 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见